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Identificação de proteínas de membrana de Leptospira interrogans serovar Copenhageni através da análise proteômica

Processo: 04/06371-1
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de janeiro de 2005 - 30 de junho de 2007
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Ana Lucia Tabet Oller Do Nascimento
Beneficiário:Ana Lucia Tabet Oller Do Nascimento
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):06/50095-4 - Identificação de proteínas de membrana de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni através da análise proteômica, BP.TT
05/52498-6 - Identificação de proteínas de membrana de Leptospira interrogans sorovar Copenhageni através da análise proteômica, BP.TT
Assunto(s):Espectrometria de massas  Leptospira interrogans  Proteínas da membrana  Vacinas  Lipoproteínas 

Resumo

O projeto propõe identificar proteínas de superfície da Leptospira interrogans empregando análise proteômica. As proteínas extraídas da membrana externa da bactéria serão separadas por eletroforese bidimensional em gel de poliacrialmida, transferidas para membranas de nitrocelulose e sondadas com soro de camundongos imunizados com a bactéria. Proteínas reativas com soro serão digeridas e analisadas por espectrometria de massa. As seqüências peptídicas obtidas serão analisadas em bancos de dados públicos e posteriormente nas seqüências do genoma da L. interrogans serovar Copenhageni (ONSA/FAPESP) (Nascimento et al., 2004a; 2004b). Nesta busca, será dada ênfase às novas lipoproteínas que terão seus genes clonados e as proteínas expressas em E. coli. As proteínas recombinantes serão purificadas por cromatografia de afinidade a metal. A atividade imunogênica dos recombinantes será avaliada em ensaios com modelo animal. (AU)