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Caracterização molecular de cianobactérias brasileiras e seleção de linhagens produtoras de peptídeos não ribossômicos

Processo: 05/56303-5
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de janeiro de 2006 - 29 de fevereiro de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Marli de Fátima Fiore
Beneficiário:Marli de Fátima Fiore
Instituição-sede: Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
Assunto(s):Cianotoxinas  Filogenia molecular  Sequenciamento  Antibióticos  Ficocianina  Reação em cadeia por polimerase (PCR) 

Resumo

Este projeto de pesquisa tem como objetivo caracterizar molecularmente linhagens de cianobactérias isoladas de regiões brasileiras por meio do seqüenciamento de uma região do operon da ficocianina a qual tem sido utilizada para diferenciar esses organismos ao nível de linhagens. As seqüências obtidas serão comparadas pela análise BLAST (NCBI) e a distância evolutiva entre as linhagens seqüenciadas serão analisadas por meio da construção de árvore filogenética. No mínimo 50 linhagens de cianobactérias deverão ser caracterizadas. Por meio da amplificação por PCR de seqüências gênicas das enzimas sintetase de peptídeo não-ribossômico (NRPS), sintase de policetônico (PKS) e sistemas híbridos de NRPS/PKS espera-se identificar entre as linhagens caracterizadas molecularmente àquelas potencialmente produtoras de compostos naturais bioquimicamente ativos. Essas enzimas são conhecidas por estarem envolvidas na biossíntese de toxinas e antibióticos. A detecção desses genes de peptídeos não ribossômicos será realizada utilizando oligonucleotídeos iniciadores degenerados tendo como alvo seqüências conservadas das enzimas NRPS, PKS e híbridos NRPS/PKS. Os produtos de PCR obtidos para essas enzimas deverão ser seqüenciados. Essas seqüências também serão comparadas pela análise BLAST e suas relações evolutivas verificadas pela construção de árvore filogenética. Metabólitos produzidos pelas linhagens que apresentarem genes dessas enzimas serão extraídos utilizando vários solventes. Os constituintes químicos dos extratos celulares obtidos serão analisados por TLC (Thin Layer Chromatography), HPLC (High Performance Liquid Chromatography) e Q-TOF-MS (Quadrupole Time-of-Flight Mass Spectrometry). A atividade inibitória desses compostos químicos será testada contra bactérias e fungos. (AU)

Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SANT'ANNA, CELIA L.; DE CARVALHO, LUCIANA R.; FIORE, MARLI F.; SILVA-STENICO, MARIA ESTELA; LORENZI, ADRIANA S.; RIOS, FERNANDA R.; KONNO, KATSUHIRO; GARCIA, CARLOS; LAGOS, NESTOR. Highly Toxic Microcystis aeruginosa Strain, Isolated from So Paulo-Brazil, Produce Hepatotoxins and Paralytic Shellfish Poison Neurotoxins. NEUROTOXICITY RESEARCH, v. 19, n. 3, p. 389-402, APR 2011. Citações Web of Science: 17.
FONSECA FORTES FURTADO, ANA LUIZA; CALIJURI, MARIA DO CARMO; LORENZI, ADRIANA STURION; HONDA, RICARDO YUKIO; GENUARIO, DIEGO BONALDO; FIORE, MARLI FATIMA. Morphological and molecular characterization of cyanobacteria from a Brazilian facultative wastewater stabilization pond and evaluation of microcystin production. Hydrobiologia, v. 627, n. 1, p. 195-209, JUL 2009. Citações Web of Science: 47.
FIORE, MARLI FATIMA; GENUARIO, DIEGO BONALDO; PAMPLONA DA SILVA, CAROLINE SOUZA; SHISHIDO, TANIA KEIKO; BERALDO MORAES, LUIZ ALBERTO; CANTUSIO NETO, ROMEU; SILVA-STENICO, MARIA ESTELA. Microcystin production by a freshwater spring cyanobacterium of the genus Fischerella. Toxicon, v. 53, n. 7-8, p. 754-761, JUN 2009. Citações Web of Science: 37.
SILVA-STENICO, MARIA ESTELA; CANTUSIO NETO, ROMEU; ALVES, IVANIO R.; MORAES, LUIZ ALBERTO B.; SHISHIDO, TANIA K.; FIORE, MARLI FATIMA. Hepatotoxin Microcystin-LR Extraction Optimization. Journal of the Brazilian Chemical Society, v. 20, n. 3, p. 535-542, 2009. Citações Web of Science: 20.
AGUIAR, ROSANE; FIORE, MARLI FATIMA; FRANCO, MAIONE WITTIG; VENTRELLA, MARILIA CONTIN; LORENZI, ADRIANA STURION; VANETTI, CLAUDIA A.; ALFENAS, ACELINO COUTO. A NOVEL EPIPHYTIC CYANOBACTERIAL SPECIES FROM THE GENUS BRASILONEMA CAUSING DAMAGE TO EUCALYPTUS LEAVES. JOURNAL OF PHYCOLOGY, v. 44, n. 5, p. 1322-1334, OCT 2008. Citações Web of Science: 16.

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