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Avaliação de diferentes metodologias para isolamento de rotavírus em cultura de células da linhagem ma-104

Processo: 06/56388-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de novembro de 2006 - 30 de abril de 2008
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
Pesquisador responsável:Maria da Glória Buzinaro
Beneficiário:Maria da Glória Buzinaro
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias (FCAV). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Jaboticabal. Jaboticabal , SP, Brasil
Assunto(s):Diarreia  Rotavirus  Tripsina 

Resumo

O presente trabalho terá como objetivo avaliar diferentes metodologias para isolamento de rotavírus de origem bovina frente a diferentes concentrações de tripsina e DEAE-Dextran em células da linhagem MA-104. Para tanto, serão colhidas amostras de fezes de bezerros de rebanhos de leite e corte, as quais serão testadas por PAGE para detecção do genoma viral de rotavírus. As amostras positivas para rotavírus serão submetidas a oito tratamentos que consistirão em: tratamento 1, não será adicionado tripsina no meio de manutenção e o inóculo será mantido; tratamento 2, será realizado mesmo procedimento do tratamento 1, porém, o inóculo será dispensado; tratamento 3 e 4, será adicionando 5 e 10 μg de tripsina no meio de manutenção, respectivamente, mantendo o inóculo; nos tratamentos 5 a 8 será acrescentado ao meio de manutenção tripsina (5 e 10 μg) e DEAE-Dextran (50 e 100 μg), mantendo o inóculo. Para o monitoramento da infecção em cultivo celular será realizada a técnica de PAGE. (AU)