(Na+, K+)- ATPase como marcador molecular da adaptação dos crustáceos a ambientes de diferentes salinidades: caracterização cinética da enzima do tecido branquial do siri Callinectes ornatus ordway, 1863 (Crustacea, Portunidea), aclimatado à salinidade de 21%

• Processo: 06/56435-1
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
• Pesquisador responsável: Francisco de Assis Leone
• Beneficiário: Francisco de Assis Leone
• Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Osmorregulação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Excrecao Amonia | Microsoma | Na,K Atpase | Osmorregulacao | Ouabaiana | Tecido Branquial

Resumo

O presente projeto tem como objetivo o estudo sistemático e comparativo das propriedades estruturais e cinéticas da (Na+,K+)-ATPase do tecido branquial de Callinectes omatus capturado no seu habitat natural bem como aclimatado a uma salinidade de até 21%. Para isso, serão realizados os seguintes estudos:1) preparação da (Na+,K+)-ATPase do tecido branquial de animais mantidos s salinidade de 21 % e de animais recém capturados. 2) caracterização cinética da atividade da enzima em relação aos ligantes ATP, Na+, K+, Mg+ e (NH4)+. 3) determinação da abundância relativa da enzima através de técnicas de imunohistoquimica. 4) caracterização da fosfoenzima em relação aos diferentes ligantes. 5) determinação da ultraestrutura das brânquias. 6) estudo do efeito de poliaminas na atividade da enzima. 7) determinação da seqüência de nuceotideos da subunidade alfa. 8) inibição pela ouabaina. 9) comparação da seqüência encontrada para o animal recém capturado com a dos aclimatados e verificação de diferenças na expressão de isoformas durante a aclimatação. (AU)