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Imunotriagem de genes de interesse de Carrapatos Rhipicephalus (Boophilus) microplus por meio da estratégia de imunologia reversa para descoberta de antígenos e desenvolvimento de uma vacina anti-carrapatos

Processo: 06/04149-5
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de agosto de 2007 - 31 de julho de 2009
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Medicina Veterinária Preventiva
Pesquisador responsável:Beatriz Rossetti Ferreira
Beneficiário:Beatriz Rossetti Ferreira
Instituição-sede: Escola de Enfermagem de Ribeirão Preto (EERP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Parasitose animal  Carrapatos  Imunologia veterinária  Vacinas  Saliva  Clonagem  RNA mensageiro  Citocinas  Bovinos 

Resumo

Carrapatos são parasitas de importância veterinária mundial que prejudicam a produção de carne, leite e couro, reduzindo significativamente a produtividade do setor pecuário. O controle é feito com agentes químicos, tóxicos para o homem e o meio ambiente. Atualmente existem duas vacinas anti-carrapatos disponíveis que, em tese, seriam métodos de controle sustentáveis. No entanto, seu desempenho está aquém do necessário, talvez devido a antígenos mal selecionados. O Laboratório de Imunoparasitologia da FMRP/USP estuda transcriptomas de R. microplus para acelerar a descoberta de novos antígenos, tendo identificado 200 clones que codificam genes de interesse (GIs) completos relacionados a proteínas salivares secretadas. A saliva de carrapatos é alvo importante da resposta imune porque neutraliza a resposta homeostática do hospedeiro. Este projeto empregará 20-40 dos 200 GIs candidatos numa imunotriagem in vitro e in vivo buscando identificar genes relacionados a proteínas que induzam resposta de hipersensibilidade cutânea tardia (DTH) e proliferação de linfócitos T em bovinos previamente infestados, resistentes ou suscetíveis ao carrapato (imunologia reversa). Nas triagens in vivo, os genes serão reclonados em vetor (TOPO VR2001) que permite clonagem TA rápida e entrega de antígenos na forma de DNA plasmideal com forte expressão das proteínas codificadas e secreção para o meio extracelular. Será ainda realizada a histologia e investigação de mRNA para citocinas inflamatórias das biópsias cutâneas cuja reações mostrarem-se positivas (DTH positivas). Na imunotriagem in vitro, células dendríticas bovinas diferenciadas in vitro serão transformadas com os GIs, sendo em seguida, medida sua capacidade de ativar células T CD4+ (produção de IFN-g; e linfoproliferação). Entre os GIs triados, aqueles que forem capazes de induzir resposta serão empregados em testes de proteção contra infestações. O desempenho alimentar e reprodutivo dos carrapatos alimentados em animais imunizados e controles indicará os antígenos protetores. (AU)

Patente(s) depositada(s) como resultado deste projeto de pesquisa

SELECTION PROCESS OF TICK ANTIGENS AND ANTI-TICK ANTIGENIC COMPOSITION 721558.0 - Office Of Technology Transfer Of National Institutes Of Health ; Universidade de São Paulo (USP) . Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos; José Marcos Chaves Ribeiro; Beatriz Rossetti Ferreira; Cecília José Veríssimo; Lucinda Giampietro Brandao; Sandra Regina Costa Maruyama; Elen Anatriello; Gustavo Rocha Garcia; Daniela Dantas Moré; Jesus Gilberto Valenzuela - 28 de junho de 2016

METHOD FOR SELECTING TICK ANTIGENS AND ANTIGENIC COMPOSITIONS AGAINST TICKS  2014354593.0 - Office Of Technology Transfer Of National Institutes Of Health ; Universidade de São Paulo (USP) . Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos; José Marcos Chaves Ribeiro; Beatriz Rossetti Ferreira; Cecília José Veríssimo; Lucinda Giampietro Brandao; Sandra Regina Costa Maruyama; Elen Anatriello; Gustavo Rocha Garcia; Daniela Dantas Moré; Jesus Gilberto Valenzuela - 26 de setembro de 2014

PROCESSO DE SELECCIÓN Y ANTÍGENOS DE GARRAPATAS Y COMPOSICIONES ANTIGÉNICAS 16-169566 - Office Of Technology Transfer Of National Institutes Of Health ; Universidade de São Paulo (USP) . Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos; José Marcos Chaves Ribeiro; Beatriz Rossetti Ferreira; Cecília José Veríssimo; Lucinda Giampietro Brandao; Sandra Regina Costa Maruyama; Elen Anatriello; Gustavo Rocha Garcia; Daniela Dantas Moré; Jesus Gilberto Valenzuela - 27 de junho de 2016

PROCESSO DE SELECCIÓN Y ANTÍGENOS DE GARRAPATAS Y COMPOSICIONES ANTIGÉNICAS MX/E/2016/036153 - Office Of Technology Transfer Of National Institutes Of Health ; Universidade de São Paulo (USP) . Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos; José Marcos Chaves Ribeiro; Beatriz Rossetti Ferreira; Cecília José Veríssimo; Lucinda Giampietro Brandao; Sandra Regina Costa Maruyama; Elen Anatriello; Gustavo Rocha Garcia; Daniela Dantas Moré; Jesus Gilberto Valenzuela - 27 de maio de 2016

METHOD FOR SELECTING TICK ANTIGENS AND ANTIGENIC COMPOSITIONS AGAINST TICKS  PCT/BR2014/000351 - Office Of Technology Transfer Of National Institutes Of Health ; Universidade de São Paulo (USP) . Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos; José Marcos Chaves Ribeiro; Beatriz Rossetti Ferreira; Cecília José Veríssimo; Lucinda Giampietro Brandao; Sandra Regina Costa Maruyama; Elen Anatriello; Gustavo Rocha Garcia; Daniela Dantas Moré; Jesus Gilberto Valenzuela - 26 de setembro de 2014

METHOD FOR SELECTING TICK ANTIGENS AND ANTIGENIC COMPOSITIONS AGAINST TICKS  ZA2016/04334 - Office Of Technology Transfer Of National Institutes Of Health ; Universidade de São Paulo (USP) . Isabel Kinney Ferreira de Miranda Santos; José Marcos Chaves Ribeiro; Beatriz Rossetti Ferreira; Cecília José Veríssimo; Lucinda Giampietro Brandao; Sandra Regina Costa Maruyama; Elen Anatriello; Gustavo Rocha Garcia; Daniela Dantas Moré; Jesus Gilberto Valenzuela - 27 de junho de 2016