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Análise do potencial das células de Schwann cultivadas e tratadas com o PEDF favorecem o trofismo de neurônios medulares in vitro a induzirem a regeneração e a recuperação motora de ratos submetidos ao trauma contuso da medula espinal pelo Impactor

Processo: 07/00491-3
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2007 - 31 de dezembro de 2009
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Gerson Chadi
Beneficiário:Gerson Chadi
Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Traumatismos da coluna vertebral  Sistema nervoso central  Células de Schwann  Plasticidade neuronal  Imuno-histoquímica 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:células de Schwann | Lesão Medular Contusa | Neuroplasticidade | Neuroproteção | neurorregeneração | terapia celular | Neurologia Experimental

Resumo

As células de Schwann (CS), um tipo de glia do sistema nervoso periférico, são agora estudadas no reparo experimental de lesões do sistema nervoso central (SNC). O fator derivado do epitélio pigmentado (PEDF) é um fator neurotrófico recém descoberto que possui potentes funções protetoras em algumas áreas do SNC, porém com grande potencial trófico aos neurônios motores da medula espinal. CS serão cultivadas a partir de fragmentos de nervo ciático de ratos adultos jovens. As culturas primárias serão purificadas e utilizadas em experimentos in vitro e in vivo. Para avaliar se a cultura de CS tratadas com o PEDF proporciona o trofismo dos neurônios motores da medula espinal, estes serão cultivados a partir de fragmentos da medula espinal de ratos Wistar neonatos e tratados com o meio condicionado das CS pré-tratadas ou não com o PEDF. A resposta trófica será estudada através da quantificação do número de células bem como da área dos prolongamentos e dos corpos celulares dos neurônios sobreviventes no decurso temporal da cultura, utilizando-se métodos estereológicos específicos. Em outra série de experimentos, Ratos Wistar adultos serão submetidos à lesão medular contusa no 10º-11º segmento torácico pelo sistema Impactor e tratados com inoculações locais de CS na presença ou não do PEDF. Ao término do procedimento cirúrgico, os ratos serão submetidos aos testes BBB, CBS e movimento motor espontâneo pelo infravermelho para análise evolução do comportamento motor durante 8 semanas. Após este período, os animais serão sacrificados e suas medulas espinais processadas para a imunohistoquímica. As respostas tróficas serão avaliadas pelo volume da lesão e pelo número de neurônios remanescentes da medula espinal nos animais lesados e tratados; os fenômenos de neuroplasticidade serão estudados através da expressão dos neuropeptídeos, substância P e neuropeptídio Y; e das proteínas estruturais, GAP-43 e MAP-2. Os preparados serão quantificados pelos métodos de análise estereológica e microdensitométrica por imagem. (AU)

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Publicações científicas (14)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DE OLIVEIRA, GABRIELA PINTAR; DUOBLES, TATIANA; CASTELUCCI, PATRICIA; CHADI, GERSON. Differential regulation of FGF-2 in neurons and reactive astrocytes of axotomized rat hypoglossal nucleus. A possible therapeutic target for neuroprotection in peripheral nerve pathology. ACTA HISTOCHEMICA, v. 112, n. 6, p. 604-617, . (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)
JULIANA MILANI SCORISA; TATIANA DUOBLES; GABRIELA PINTAR DE OLIVEIRA; JESSICA RUIVO MAXIMINO; GERSON CHADI. Revisão dos métodos de obtenção de células não neuronais para o estudo da fisiopatologia da Esclerose Lateral Amiotrófica ao nível molecular in vitro. Acta Cirurgica Brasileira, v. 25, n. 3, p. 281-289, . (99/01319-1, 07/00491-3, 98/13122-5)
RAMOS ANDRADE, MICHELE SCHULTZ; MENDONCA, LUCIO MARIO; CHADI, GERSON. Treadmill running protects spinal cord contusion from secondary degeneration. Brain Research, v. 1346, p. 266-278, . (99/01319-1, 01/14957-8, 07/00491-3, 98/13122-5, 00/02131-5, 09/14214-7)
CHADI, GERSON; MAXIMINO, JESSICA RUIVO; DE OLIVEIRA, GABRIELA PINTAR. The importance of molecular histology to study glial influence on neurodegenerative disorders. Focus on recent developed single cell laser microdissection. Journal of Molecular Histology, v. 40, n. 4, p. 241-250, . (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)
BOMBEIRO, ANDRE LUIS; D'IMPERIO LIMA, MARIA REGINA; CHADI, GERSON; ALVAREZ, JOSE MARIA. Neurodegeneration and Increased Production of Nitrotyrosine, Nitric Oxide Synthase, IFN-gamma and S100 beta Protein in the Spinal Cord of IL-12p40-Deficient Mice Infected with Trypanosoma cruzi. NEUROIMMUNOMODULATION, v. 17, n. 2, p. 67-78, . (06/50054-6, 06/53116-2, 07/00491-3)
DE OLIVEIRA, GABRIELA PINTAR; MAXIMINO, JESSICA RUIVO; LIN, CHIN JIA; CHADI, GERSON. A method to immunolabel rodent spinal cord neurons and glia for molecular study in specific laser microdissected cells involved in neurodegenerative disorders. Journal of Molecular Histology, v. 40, n. 3, p. 217-225, . (99/01319-1, 98/13122-5, 04/08926-0, 07/00491-3)
GUZEN, FAUSTO PIERDONA; DE ALMEIDA LEME, RICARDO JOSE; RAMOS DE ANDRADE, MICHELE SCHULTZ; DE LUCA, BIANCA APARECIDA; CHADI, GERSON. Glial cell line-derived neurotrophic factor added to a sciatic nerve fragment grafted in a spinal cord gap ameliorates motor impairments in rats and increases local axonal growth. RESTORATIVE NEUROLOGY AND NEUROSCIENCE, v. 27, n. 1, p. 1-16, . (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)
GOMIDE, VANIA C.; LAUREANO, MAURA R.; SILVEIRA, GILCELIO A.; CHADI, GERSON. Neuropeptide Y in Rat Spiral Ganglion Neurons and Inner Hair Cells of Organ of Corti and Effects of a Nontraumatic Acoustic Stimulation. International Journal of Neuroscience, v. 119, n. 4, p. 508-530, . (99/01319-1, 98/13122-5, 07/00491-3)
JOÃO GABRIEL MARTINS DALLO; BERNARDO VERGARA REICHERT; JOSÉ BENEDITO RAMOS VALLADÃO JÚNIOR; CAMILA SILVA; BIANCA APARECIDA DE LUCA; BEATRIZ DE FREITAS AZEVEDO LEVY; GERSON CHADI. Respostas astrocitárias na medula espinal do rato submetido ao esmagamento duplo do nervo ciático e tratado com injeção local de suspensão de células de Schwann cultivadas ou de extrato de medula espinal lesada: implicações na terapia celular para o reparo do nervo. Acta Cirurgica Brasileira, v. 22, n. 6, p. 485-494, . (99/01319-1, 07/00491-3, 98/13122-5)

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