Auxílio à pesquisa 07/01186-0 - Resistência genética vegetal, Virose vegetal - BV FAPESP
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Transformação genética de abobrinha-de-moita (Cucurbita pepo) e melancia (Citrullus lanatus) para resistência ao Papaya ringspot virus: type Watermelon (PRSV-W) e ao Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV)

Processo: 07/01186-0
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade
Pesquisador responsável:Beatriz Madalena Januzzi Mendes
Beneficiário:Beatriz Madalena Januzzi Mendes
Instituição Sede: Centro de Energia Nuclear na Agricultura (CENA). Universidade de São Paulo (USP). Piracicaba , SP, Brasil
Assunto(s):Resistência genética vegetal  Virose vegetal  Plantas geneticamente modificadas  Expressão gênica  Inoculação 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:abobrinha de moita | melancia | Prsv-W | resistência a doenças | transformação genética | Zymv | Resistência a doenças

Resumo

As doenças causadas por vírus são consideradas um dos maiores problemas para a produção de cucurbitáceas, uma vez que podem reduzir significativamente a produtividade das culturas, além de afetar a qualidade dos frutos. No Brasil, são descritos 8 vírus infectando cucurbitáceas, sendo o Papaya ringspot virus - type W (PRSV-W) e o Zucchini yellow mosaic virus (ZYMV) os mais importantes, pela alta incidência nas principais regiões produtoras. O controle destas viroses é dificultado pela ausência de resistência ou tolerância em Citrullus lanatus e Cucurbita pepo, associada à baixa eficiência do controle químico dos vetores e à dificuldade de utilização de práticas culturais que minimizem a disseminação dos vírus. Uma alternativa para o controle de doenças causadas por vírus é a produção de plantas transgênicas expressando genes do patógeno, aplicando-se o conceito da resistência derivada do patógeno (Pathogen-Derived Resistance PDR). O objetivo deste projeto de pesquisa é o desenvolvimento de plantas transgênicas de abobrinha-de-moita e melancia via Agrobacterium tumefaciens, contendo fragmentos dos genes da capa protéica dos vírus PRSV-W e ZYMV, numa construção gênica do tipo hairpin, e avaliação destas plantas para resistência aos vírus PRSV-W e ZYMV. Será utilizada uma construção gênica contendo fragmentos de 200 pb do genoma dos vírus em estudo ligados na orientação senso e antisenso, separados por um intron. A expressão será dirigida pelo promotor 35S e o terminador Nos, e a seleção das plantas transgênicas será realizada pelo gene de seleção nptII. Após a transformação genética as gemas adventícias transgênicas desenvolvidas serão identificadas por PCR. As gemas PCR positivas serão alongadas e as plantas obtidas aclimatizadas para casa-de-vegetação. A confirmação da integração e expressão do transgene será feita pelas análises de Southern e northern blot. A plantas confirmadas como transgênicas serão inoculadas com os vírus em estudo avaliando-se o desenvolvimento dos sintomas e a presença dos vírus. As plantas serão autofecundadas para obtenção de sementes para futuras análises da progênie. (AU)

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