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Estudo do papel de eif5a na inter-relacao dos processos de traducao e degradacao de mrna em saccharomyces cerevisiae.

Resumo

A proteína eIF5A está envolvida com diferentes etapas do metabolismo de mRNA, como o início de tradução, o transporte nucleocitoplasmático de mRNA e a sua degradação citoplasmática. Ainda, este fator está envolvido com a progressão do ciclo celular. Recentemente, nosso laboratório gerou novas evidências que fortalecem o envolvimento de eIF5A com a maquinaria de tradução, mas a função exata desta proteína ainda não foi elucidada. O Objetivo Geral do presente projeto é contribuir para a compreensão sobre os efeitos de eIF5A na inter-relação entre as etapas de tradução e decaimento de mRNA em S. cerevisiae. Para isto, os seguintes Objetivos Específicos estão sendo propostos: 1) Analisar os efeitos do gene supressor SBP1 sobre o defeito de decaimento de mRNA no mutante tif51A-1; 2) Realizar estudos de localização subcelular para determinar a relação de eIF5A com a organização dos P bodies; 3) Analisar o perfil polissomal de eIF5A em condições de repressão da tradução induzidas por diferentes tipos de estresse celular; 4) Avaliar a existência de interação genética sintética entre mutantes de eIF5A e mutantes de fatores envolvidos com a degradação de mRNA; 5) Verificar se o defeito na degradação de mRNAs de mutantes de eIF5A se dá em etapas anteriores ou posteriores à retirada do capacete de metilguanosina; 6) Clonar genes supressores do fenótipo de sensibilidade a temperatura do mutante tif51A-1 de eIF5A através de deleções genômicas induzidas por mini-transposon. (AU)

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