| Processo: | 10/05099-7 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Vigência: | 01 de junho de 2010 - 31 de maio de 2012 |
| Área do conhecimento: | Ciências Agrárias - Agronomia - Fitossanidade |
| Pesquisador responsável: | Henrique Ferreira |
| Beneficiário: | Henrique Ferreira |
| Instituição Sede: | Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil |
| Pesquisadores associados: | Mauricio Bacci Junior |
| Assunto(s): | Cancro (doença de planta) Xanthomonas axonopodis Análise de sequência de DNA Genomas Expressão gênica Agentes microbianos Citricultura |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | Antimicrobianos | Cancro cítrico | citri | segregacao cromossomica | Xanthomonas citri subsp | fitopatologia |
Resumo
A bactéria Xanthomonas citri subsp. citri (Xcc) é o agente etiológico do cancro cítrico, uma doença severa que afeta plantas de citros em todo o mundo e para a qual não há uma forma eficaz de controle. Há praticamente uma década, o genoma de Xcc foi completamente sequenciado em um esforço para se acelerar o conhecimento da biologia desta bactéria e também, em parte, devido à importância econômica da doença que ela causa. A anotação de seu genoma revelou 4.313 ORFs das quais 2.710 codificam para produtos homólogos a proteínas já conhecidas, sendo o restante, 30-40%, desconhecidas ou hipotéticas. A obtenção do genoma de Xcc sem dúvida representou um marco nos estudos deste microrganismo, porém, muito pouco ainda se sabe sobre alguns de seus processos essenciais como replicação e segregação do material genético, septação, divisão e crescimento celular. Tais processos são em geral conduzidos em bactérias por complexos protéicos apresentando diferenças significativas quando em comparação com complexos de função análoga em eucariotos mais derivados e são, portanto, excelentes alvos para o desenvolvimento de agentes antimicrobianos. Esta proposta tem por finalidade iniciar estudos sobre o processo de segregação cromossômica em Xcc através da caracterização da proteína ParB, potencialmente codificada por este microrganismo (ParBXcc). Proteínas do tipo ParB se ligam ao DNA e são capazes de formar complexos funcionalmente semelhantes aos centrômeros eucarióticos, tendo uma provável atuação na correta partição de cromossomos. A caracterização de ParBXcc envolverá disrupção gênica da ORF que a codifica para medirmos sua essencialidade; sua expressão em Xcc na forma de proteína de fusão contendo a cauda TAP para averiguarmos a provável interação de ParBXcc-TAP com ParB nativo (proteínas tipo ParB em outros microrganismos formam dímeros) e ainda com ParAXcc e SMCXcc; faremos também a localização subcelular de ParB-GFP em Xcc, que poderá apresentar fenótipo semelhante aos observados para proteínas análogas em outras bactérias (dois foci co-localizando com as regiões das origens de replicação cromossômica); finalmente, faremos a caracterização bioquímica de ParBXcc purificada a partir de E. coli onde mediremos suas propriedades de ligação ao DNA e formação de complexos núcleo-protéicos de alta ordem. A constatação de existência e funcionalidade de um sistema de partição cromossômica ParA/B em Xcc abrirá nova frente de pesquisa sobre a manutenção da integridade cromossômica nesta bactéria e fornecerá informações que poderão contribuir para o desenvolvimento de novas estratégias e drogas para o controle do cancro cítrico. (AU)
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