Vias alternativas mitocondriais: estudos bioquímicos e moleculares de uma UCP-like de Aspergillus sp

• Processo: 09/08470-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de setembro de 2009 - 31 de agosto de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Sergio Akira Uyemura
• Beneficiário: Sergio Akira Uyemura
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Lipossomos Aspergillus fumigatus Escherichia coli
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus fumigatus | expressão heteróloga | lipossomos | mitocôndria | UCP-like | Mitocôndrias

Resumo

O nosso laboratório caracterizou previamente a cadeia respiratória do A. fumigatus. Nós demonstramos, que além da via do citocromo c, este organismo possui vias alternativas, envolvendo uma oxidase e NADH desidrogenase alternativa e uma proteína desacopladora. Estas vias tem sido associadas com a via energética e com a defesa antioxidante das células, a qual representa um importante fator para a sobrevivência em macrófagos durante a invasão do fungo no hospedeiro. Existem inúmeras evidencias da presença de UCP em microrganismos como em Candida parasiplosis, Acanthamoeba castelani and Aspergillus sp. Entretanto, até o momento nenhuma seqüência de DNA foi descrita nesses microrganismos. Resultados preliminares em nosso laboratório utilizando primers degenerados, desenhados a partir de múltiplos alinhamentos de seqüências de aminoácidos de UCPs, nós conseguimos uma sequencia que apresenta três assinaturas moleculares atribuídas as UCPs. O objetivo deste projeto é clonar, seqüenciar e expressar em E. coli a seqüência da UCP-like. Além disso, obter a proteína recombinante para ser reconstituída em proteolipossomos, a fim de caracterizar bioquímica está enzima. (AU)