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Caracterização estrutural e funcional de proteínas envolvidas na virulência do protozoário parasita Leishmania major

Processo: 07/06755-2
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de maio de 2008 - 30 de abril de 2010
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Química de Macromoléculas
Pesquisador responsável:Arthur Henrique Cavalcante de Oliveira
Beneficiário:Arthur Henrique Cavalcante de Oliveira
Instituição Sede: Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto (FFCLRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Enzimas  Leishmania  Mutagênese sítio-dirigida  Virulência  Proteoma  Parasitismo 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:enzimas | leishmania | mutação sítio-dirigida | Proteoma de parasitas | Superexpressão de proteínas | Virulência de parasitas | Bioquímica de Proteínas de Parasitas

Resumo

O estudo de estrutura e função de proteínas de Leishmania possibilita o entendimento das bases moleculares da interação parasita/hospedeiro e a apresentação de novos alvos a serem utilizados no desenvolvimento de terapias contra o parasita. O presente projeto tem como objetivo a caracterização estrutural e funcional de proteínas de L. major, identificadas anteriormente em estudo de subproteoma de vesículas de espécies de Leishmania e implicadas na interação parasita/ hospedeiro, candidatas a fatores de virulência. A estratégia é baseada na convergência de estudos de biologia estrutural e análise funcional para a elucidação das funções dessas proteínas na biologia do parasita, focalizando fatores patogênicos. Dois alvos foram selecionados no subproteoma baseando-se nas funções imunomodulatórias que elas exercem em outros organismos patogênicos: a NDK (Nucleosídeo Difosfato Kinase) e o MIF (Fator Inibitório da Migração de Macrófagos). Esses dois alvos de estudo ainda não foram caracterizados em parasitas tripanossomatídeos. O projeto será desenvolvido por meio de duas abordagens de estudo. A primeira direcionada para a caracterização estrutural e enzimática dos dois alvos por meio de cinética enzimática, estudos de espectroscopia e resolução da estrutura tridimensional. A segunda abordagem será direcionada para a caracterização funcional das proteínas na L. major por meio da imunolocalização das proteínas, efeito dessas proteínas em macrófagos, superexpressão dos genes nas formas promastigotas de L. major e análise da virulência dos suprexpressores. (AU)

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Publicações científicas (6)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
VIEIRA, PLINIO S.; DE JESUS SANTOS, ANA P.; DE OLIVEIRA, ARTHUR H. C.. Biophysical Characterization of the Nucleoside Diphosphate Kinase of Leishmania major and Effect of the P95S Mutation. PROTEIN AND PEPTIDE LETTERS, v. 23, n. 2, p. 99-106, . (11/20569-2, 07/06755-2, 10/03761-4)
DE OLIVEIRA, ARTHUR H. C.; FERREIRA, TATIANA L.; WARD, RICHARD J.. Reduced pH induces an inactive non-native conformation of the monomeric bothropstoxin-I (Lys49-PLA(2)). Toxicon, v. 54, n. 3, p. 373-378, . (07/06755-2, 07/51561-1)
VIEIRA, PLINIO SALMAZO; DE GIUSEPPE, PRISCILA OLIVEIRA; CAVALCANTE DE OLIVEIRA, ARTHUR HENRIQUE; MURAKAMI, MARIO TYAGO. The role of the C-terminus and Kpn loop in the quaternary structure stability of nucleoside diphosphate kinase from Leishmania parasites. Journal of Structural Biology, v. 192, n. 3, p. 336-341, . (11/20569-2, 10/03761-4, 07/06755-2, 11/24178-8, 10/51730-0)
VIEIRA, PLINIO SALMAZO; CAMPOS BRASIL SOUZA, TATIANA DE ARRUDA; HONORATO, RODRIGO VARGAS; ZANPHORLIN, LETICIA MARIA; SEVERIANO, KELVEN ULISSES; ROCCO, SILVANA APARECIDA; CAVALCANTE DE OLIVEIRA, ARTHUR HENRIQUE; CORDEIRO, ARTUR TORRES; LOPES OLIVEIRA, PAULO SERGIO; DE GIUSEPPE, PRISCILA OLIVEIRA; et al. Pyrrole-indolinone SU11652 targets the nucleoside diphosphate kinase from Leishmania parasites. Biochemical and Biophysical Research Communications, v. 488, n. 3, p. 461-465, . (11/20569-2, 10/03761-4, 07/06755-2, 11/24178-8, 10/51730-0)
COSTA TONOLI, CELISA CALDANA; VIEIRA, PLINIO SALMAZO; WARD, RICHARD JOHN; ARNI, RAGHUVIR KRISHNASWAMY; CAVALCANTE DE OLIVEIRA, ARTHUR HENRIQUE; MURAKAMI, MARIO TYAGO. Production, purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction studies of the nucleoside diphosphate kinase b from Leishmania major. ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY COMMUNICATIONS, v. 65, n. 11, p. 1116-1119, . (07/06755-2)
COSTA TONOLI, CELISA CALDANA; VIEIRA, PLINIO SALMAZO; WARD, RICHARD JOHN; ARNI, RAGHUVIR KRISHNASWAMY; CAVALCANTE DE OLIVEIRA, ARTHUR HENRIQUE; MURAKAMI, MARIO TYAGO. Production, purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction studies of the nucleoside diphosphate kinase b from Leishmania major. ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION F-STRUCTURAL BIOLOGY COMMUNICATIONS, v. 65, p. 4-pg., . (07/06755-2)

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