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Estudo pré clínico da adequação e validação experimental do cultivo de células de Schwann humanas

Processo: 07/07630-9
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2008 - 31 de maio de 2011
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina
Pesquisador responsável:Mario Gilberto Siqueira
Beneficiário:Mario Gilberto Siqueira
Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Terapia baseada em transplante de células e tecidos  Regeneração nervosa  Células de Schwann  Células cultivadas 

Resumo

A colheita, enriquecimento e a manutenção de células de Schwann de ratos é um procedimento bem estabelecido. No entanto, a obtenção e o cultivo de células de Schwann humanas adequadas para experimentação in vivo e para posterior utilização clínica necessitam de melhor adequação e validação. Neste estudo, a cultura primária de células de Schwann humanas será realizada seguindo protocolo modificado sugerido por nosso laboratório, protocolo este que será avaliado neste projeto. Fragmento o nervo sural será obtido durante o ato cirúrgico da utilização do nervo no reparo de lesões do plexo braquial. O fragmento será levado para o laboratório e duas variáveis experimentais de cultivo serão testadas: Mitógeno Tardio e Mitógeno Precoce. A eficiência do procedimento será avaliada pela análise do crescimento celular e validada pela comprovação do tipo celular que cresceu na cultura através da técnica de Western Blotting empregando-se marcadores celulares específicos para células humanas em quatro passagens sucessivas. A capacidade de incorporação e a sobrevida das células de Schwann humanas serão avaliadas dois meses após a utilização delas no reparo da lesão do nervo ciático do rato pela técnica da tubulização. Finalmente, a possibilidade de estas células formarem tumores após enxertos será verificada histopatologicamente dois meses após a inoculação delas em várias regiões do corpo do rato imunodeficiente. O projeto possibilitará o desenvolvimento tecnológico da obtenção das culturas de células de Schwann humanas e a validação necessária para a utilização delas na prática médica. (AU)