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Avaliação do papel dos receptores TLR2 e TLR4 na produção de citocinas por fibroblastos humanos periodontais deficientes desses receptores

Processo: 10/01230-1
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2010 - 31 de maio de 2012
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
Pesquisador responsável:Carlos Ferreira dos Santos
Beneficiário:Carlos Ferreira dos Santos
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Bauru (FOB). Universidade de São Paulo (USP). Bauru , SP, Brasil
Pesquisadores associados:Carlos Alberto de Souza Costa
Assunto(s):Receptor 4 toll-like  Receptor 2 toll-like  Citocinas  Periodontite  Fibroblastos 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:citocinas | fibroblastos | Periodontite | Tlr2 | Tlr4 | Periodontia

Resumo

Fibroblastos periodontais são células capazes de responder à estímulos bacterianos com a liberação de substâncias, tais como citocinas e quimiocinas, que participam de maneira ativa no processo inflamatório. Há evidências do reconhecimento desses estímulos pela participação de receptores do tipo Toll (TLRs), sendo o TLR2 e TLR4 bastante estudados como responsáveis por esse mecanismo nos fibroblastos de ligamento periodontal e de gengiva. No entanto, essa expressão de receptores pelos fibroblastos periodontais permanece controversa na literatura e ainda não há estudos que avaliem o comportamento dessas células, quando deficientes desses receptores, quanto à expressão de citocinas como MIP-1±, SDF-1, IL-6 e IL-10. Assim sendo, este trabalho tem como objetivos: avaliar e comparar a expressão de receptores TLR2 e TLR4 por fibroblastos humanos provenientes de ligamento periodontal e de gengiva estimulados por lipopolissacarídeo (LPS) de P. gingivalis e avaliar a produção de citocinas em fibroblastos deficientes desses receptores. Serão coletados ligamentos periodontais de terceiros molares hígidos e biópsias de gengiva dos mesmos doadores (n=3). Estes tecidos serão picotados e mantidos em meio de cultura adequado para fibroblastos, sendo utilizados entre a 4ª e 8ª passagem. Após adesão dos fibroblastos a placas de 24 poços, o meio de cultura contendo 0,1 - 10 ¼g/mL de LPS de P. gingivalis será adicionado às placas em duplicata. A expressão de TLR2 e TLR4 será analisada por western blot nas células estimuladas em comparação às células não submetidas ao estímulo (controle). Será feito o silenciamento dos genes de TLR2 e TLR4 por meio da utilização de RNAi, seguido de testes que avaliem a eficiência da transfecção das culturas como RealTimePCR e Western Blot . Para avaliar a produção de citocinas pelos fibroblastos deficientes de TLR2 e TLR4, será feito ELISA. (AU)

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Publicações científicas (6)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
KARIN CRISTINA DA SILVA MODENA; ADRIANA MARIA CALVO; CARLA RENATA SIPERT; THIAGO JOSÉ DIONÍSIO; MARIA FIDELA DE LIMA NAVARRO; MARIA TERESA ATTA; CARLOS FERREIRA SANTOS. Dental Pulp Fibroblasts Response after Stimulation with HEMA and Adhesive System. Brazilian Dental Journal, v. 29, n. 5, p. 419-426, . (05/60167-0, 10/01230-1)
AZEVEDO, FABIOLA PONTES; FARIA MORANDINI, ANA CAROLINA; SIPERT, CARLA RENATA; DIONISIO, THIAGO JOSE; SANTOS, CARLOS FERREIRA; DAMANTE, CARLA ANDREOTTI; RUBO DE REZENDE, MARIA LUCIA; PASSANEZI SANT'ANA, ADRIANA CAMPOS; AGUIAR GREGHI, SEBASTIAO LUIZ. Palatal mucosa derived fibroblasts present an adaptive behavior regarding cytokine secretion when grafted onto the gingival margin. BMC ORAL HEALTH, v. 14, . (10/01230-1)
MORANDINI, ANA CAROLINA; CHAVES SOUZA, PEDRO PAULO; RAMOS-JUNIOR, ERIVAN SCHNAIDER; SOUZA COSTA, CARLOS ALBERTO; SANTOS, CARLOS FERREIRA. MyD88 or TRAM Knockdown Regulates Interleukin (IL)-6, IL-8, and CXCL12 mRNA Expression in Human Gingival and Periodontal Ligament Fibroblasts. Journal of Periodontology, v. 84, n. 9, p. 1353-1360, . (10/01230-1)
MORANDINI, ANA CAROLINA F.; CHAVES SOUZA, PEDRO PAULO; RAMOS-JUNIOR, ERIVAN SCHNAIDER; BROZOSKI, DANIEL THOMAS; SIPERT, CARLA RENATA; SOUZA COSTA, CARLOS ALBERTO; SANTOS, CARLOS FERREIRA. Toll-Like Receptor 2 Knockdown Modulates Interleukin (IL)-6 and IL-8 but not Stromal Derived Factor-1 (SDF-1/CXCL12) in Human Periodontal Ligament and Gingival Fibroblasts. Journal of Periodontology, v. 84, n. 4, p. 535-544, . (10/01230-1)
KARIN CRISTINA DA SILVA MODENA; ADRIANA MARIA CALVO; CARLA RENATA SIPERT; BELLA LUNA COLOMBINI-ISHIKIRIAMA; THIAGO JOSÉ DIONÍSIO; MARIA FIDELA DE LIMA NAVARRO; MARIA TERESA ATTA; CARLOS FERREIRA SANTOS. Molecular Response of Pulp Fibroblasts after Stimulation with Pulp Capping Materials. Brazilian Dental Journal, v. 31, n. 3, p. 244-251, . (05/60167-0, 15/03965-2, 10/01230-1)
SANTOS, CARLOS F.; MORANDINI, ANA C.; DIONISIO, THIAGO J.; FARIA, FLAVIO A.; LIMA, MARTA C.; FIGUEIREDO, CAIO M.; COLOMBINI-ISHIKIRIAMA, BELLA L.; SIPERT, CARLA R.; MACIEL, RUBENS P.; AKASHI, ANA P.; et al. Functional Local Renin-Angiotensin System in Human and Rat Periodontal Tissue. PLoS One, v. 10, n. 8, . (13/16113-9, 05/60167-0, 09/53848-1, 09/15372-5, 10/01230-1, 04/13479-3)

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