Estudo das proteínas estruturais e a caracterização da proteina codificada pela ORF-31 do Nucleopoliedrovírus Anticarsia gemmatalis (AgMNPV-2D) em linhagens de células de inseto distintas

• Processo: 08/10713-6
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de fevereiro de 2009 - 31 de julho de 2011
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Paolo Marinho de Andrade Zanotto
• Beneficiário: Paolo Marinho de Andrade Zanotto
• Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Virologia Fitossanidade Controle biológico Lagartas Fenótipo Morfogênese

Resumo

Desde a década de 80, o nucleopoliedrovírus Anticarsia gemmatalis (AgMNPV) tem sido utilizado em diversos países da América Latina e Estados Unidos como agente de controle biológico no combate à lagarta-da-soja. No Brasil, ele é aplicado em cerca de dois milhões de hectares de plantação, com significativos benefícios econômicos e ecológicos ao país. Outra característica importante do AgMNPV é o seu uso como vetor de clonagem e expressão de genes eucarióticos. Este vírus envelopado, pertencente à família Baculoviridae, possui DNA circular de fita dupla contida em um capsídeo protéico, que pode estar ocluído em uma matriz para-cristalina. A expressão gênica em cascata é temporalmente regulada, onde genes expressos em cada classe temporal regulam a expressão de genes da fase seguinte. Dada a sua grande importância comercial e biotecnológica, este vírus tem sido alvo de inúmeros estudos. Nosso laboratório coordenou e concluiu o sequenciamento do genoma do AgMNPV-2D, indicando a presença de potencialmente 152 ORFs. Como consequência natural do sequenciamento, este projeto tem como objetivos: (i) Determinar e caracterizar parte das sequências de proteínas estruturais do AgMNPV-2D; (ii) Identificar as diferentes proteínas expressas nos dois fenótipos virais (ODV e BV), em linhagens distintas de células de lepidópteros ; (iii) Mapear in silico as ORFs responsáveis pela expressão das proteínas estruturais dos dois fenótipos virais e; (iv) expressar, caracterizar e quantificar as possíveis atividades da ORF-31. Para isto utilizaremos as metodologias: SDS Page, eletroforese 2D, espectometria de massa, clonagem, imunodetecção, localização por fluorescência e ensaio quantitativo de atividade. O estudo das proteínas possibilitará o melhor entendimento da morfogênese do AgMNPV e, de fatores associados à multiplicação viral. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BRACONI, CARLA TORRES; PEREIRA ARDISSON-ARAUJO, DANIEL MENDES; PAES LEME, ADRIANA FRANCO; DE CASTRO OLIVEIRA, JULIANA VELASCO; PAULETTI, BIANCA ALVES; GARCIA-MARUNIAK, ALEJANDRA; RIBEIRO, BERGMANN MORAIS; MARUNIAK, JAMES E.; DE ANDRADE ZANOTTO, PAOLO MARINHO. Proteomic analyses of baculovirus Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus budded and occluded virus. JOURNAL OF GENERAL VIROLOGY, v. 95, n. 4, p. 980-989, APR 2014. Citações Web of Science: 14.

VILLABONA-ARENAS, CHRISTIAN JULIAN; DE ANDRADE ZANOTTO, PAOLO MARINHO. Evolutionary history of Dengue virus type 4: Insights into genotype phylodynamics. INFECTION GENETICS AND EVOLUTION, v. 11, n. 5, p. 878-885, JUL 2011. Citações Web of Science: 24.