Validação da PCR multiplex na detecção e identificação de Candida spp. em infecções de corrente sanguínea de pacientes pediátricos internados em unidades de terapia intensiva

• Processo: 10/09715-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de outubro de 2010 - 31 de dezembro de 2012
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Gilda Maria Barbaro Del Negro
• Beneficiário: Gilda Maria Barbaro Del Negro
• Instituição Sede: Instituto de Medicina Tropical de São Paulo (IMT). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Carlos Pelleschi Taborda ; Gil Benard ; Thelma Suely Okay
• Assunto(s): Clínica médica Pediatria Infectologia Candida Unidades de terapia intensiva pediátrica Reação em cadeia por polimerase (PCR)
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Candida | Candidemia | hemocultura | PCR multiplex | Pediatria | Infectologia pediátrica

Resumo

As infecções sistêmicas causadas por Candida spp. representam importante causa de morbidade e mortalidade em pacientes pediátricos internados em UTIs. Os métodos convencionais de cultivo apresentam sensibilidade limitada e demandam tempo prolongado para a identificação das espécies infectantes. A Reação em Cadeia da Polimerase (PCR) requer pequenos volumes de sangue para análise, situação ideal para crianças gravemente enfermas, propiciando diagnóstico rápido e preciso. Este estudo tem como objetivo validar a técnica de PCR multiplex, para identificar sete espécies de Candida em amostras de sangue de pacientes pediátricos com risco de desenvolver fungemia, e verificar o grau de concordância dos resultados com as hemoculturas. Serão analisadas amostras sanguíneas de 30 pacientes recém-nascidos e de 30 pacientes com idade entre 30 dias e 20 anos incompletos, internados em UTIs do Instituto da Criança (ICr) - HCFMUSP, que apresentarem condições clínicas com risco de desenvolver candidemia. O grupo controle será constituído de 30 crianças sem doenças infecciosas, internadas no ICr para cirurgias de pequeno porte. Serão determinados os limiares de detecção e especificidade do sistema de amplificação com primers espécie-específicos. As amostras de DNA extraídas do sangue dos pacientes serão submetidas às PCR e os produtos amplificados analisados por eletroforese em géis de agarose. A concordância entre os resultados obtidos pelas hemoculturas e pelas PCR será avaliada pelo teste de McNemar. Para resultados que forem positivos somente pela técnica molecular, os produtos serão submetidos ao seqüenciamento automatizado. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TAIRA, CLEISON LEDESMA; OKAY, THELMA SUELY; DELGADO, ARTUR FIGUEIREDO; JURFEST RIVERO CECCON, MARIA ESTHER; GOTTARDO DE ALMEIDA, MARGARETE TERESA; BARBARO DEL NEGRO, GILDA MARIA. A multiplex nested PCR for the detection and identification of Candida species in blood samples of critically ill paediatric patients. BMC INFECTIOUS DISEASES, v. 14, JUL 21 2014. (10/09715-4, 10/02626-6)

DE ALMEIDA, JR., JOAO NOBREGA; MOTTA, ADRIANA LOPES; ROSSI, FLAVIA; ABDALA, EDSON; PIERROTTI, LIGIA CAMERA; GONCALVES KONO, ADRIANA SATIE; ESTEVEZ DIZ, MARIA DEL PILAR; BENARD, GIL; BARBARO DEL NEGRO, GILDA MARIA. First report of a clinical isolate of Candida haemulonii in Brazil. Clinics, v. 67, n. 10, p. 1229-1231, 2012. (10/09715-4)