Desenvolvimento de bioproduto de elevada afinidade pela enzima gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase de Trypanosoma cruzi

• Processo: 08/04127-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de abril de 2009
• Data de Término da vigência: 31 de março de 2012
• Área do conhecimento: Interdisciplinar
• Pesquisador responsável: Carlos Alberto Montanari
• Beneficiário: Carlos Alberto Montanari
• Instituição Sede: Instituto de Química de São Carlos (IQSC). Universidade de São Paulo (USP). São Carlos , SP, Brasil
• Assunto(s): Planejamento de fármacos Síntese de fármacos Tripanossomicidas Gliceraldeído-3-fosfato desidrogenases Calorimetria Doença de Chagas Trypanosoma cruzi
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Biocalorimetria | Doença de Chagas | Planejamento molecular | Síntese de fármacos | Teste de Ames e de micro-núcleos | Química Medicinal

Resumo

Há um grande interesse no desenvolvimento de novos agentes tripanossomicidas com impacto potencial no tratamento de indivíduos que sofrem da doença de Chagas. Estudos que objetivam o entendimento das bases moleculares da ação farmacológica de flavonóides ativos contra a enzima gliceraldeído 3-fosfato desidrogenase de Trypamosoma cruzi (TcGAPDH), bem como contra a forma tripomastigota desse tripanossomatídeo estão sendo realizados em nosso grupo. Os trabalhos previamente realizados no Laboratório de Modelagem Molecular e Planejamento de Fármacos do grupo de Química Medicinal do IQSC foram importantes na identificação do flavonóide tilirosídeo como inibidor da TcGAPDH. A sua identificação deu-se essencialmente através do planejamento baseado na estrutura 3D da TcGAPDH. Os ensaios espectrofométricos e calorimétricos frente à TcGAPDH monstraram que o tilirosídeo inibe a enzima nas concentrações de 46 mM (IC50) e 25 mM (Ki), respectivamente. O ensaio do tilirosídeo contra a forma tripomastigota da cepa Y (resistente) do T. cruzi foi positivo e o valor de IC50 foi de 770 mM. Embora elevado para os padrões da WHO, o benzonidazol (único fármaco em uso para o tratamento da doença de Chagas) foi ativo na potência de 400 mM. Com uma relação de concentração hipotética mM ® mM estabelecida, estes resultados sugerem que derivados do tilirosídeo sejam racionalmente sintetizados com o objetivo de aprimorar os requisitos moleculares essenciais para a interação com a TcGAPDH. Neste projeto, tendo como base a estrutura tilirosídeo-TcGAPDH, será realizada uma análise combinatória de otimização da estrutura do tilirosídeo. Os derivados identificados com bom ajuste ao sítio da enzima serão sintetizados e testados contra a TcGAPDH. A procura por bioisósteros cujos fragmentos ajustem-se à forma, química e natureza eletrostática do tilirosídeo também será realizada. Os novos inibidores da TcGAPDH serão então testados contra as formas infectivas do T. cruzi. Estudos de relações estrutura-atividade (SAR) serão realizados para os inibidores enzimáticos e para os ativos contra as formas tripomastigota e amastigota do T. cruzi. Estudos preliminares de toxidez dos análogos do tilirosídeo serão realizados. (AU)