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Avaliação morfofuncional da espermatogônia tronco durante a espermatogênese sazonal de rãs-touro

Processo: 09/17895-5
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2010 - 31 de maio de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
Pesquisador responsável:Estela Sasso Cerri
Beneficiário:Estela Sasso Cerri
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia (FOAr). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Assunto(s):Histologia animal  Reprodução animal  Anfíbios  Rã-touro  Espermatogênese  Imuno-histoquímica  Células-tronco  Sazonalidade 

Resumo

Nos anfíbios, a espermatogênese e a esteroidogênese variam de acordo com a sazonalidade. No inverno, as células intersticiais de Leydig são escassas e quiescentes. Entretanto, nos lóbulos seminíferos, as espermatogônias primordiais (EP) são fortemente imuno-positivas para testosterona. Em alguns sapos, tem sido demonstrado que a testosterona é convertida em estrógeno pela enzima aromatase e que este hormônio (estrógeno) apresenta um importante papel sobre a espermatogênese. Portanto, será proposto avaliar os níveis séricos de testosterona, bem como localizar a testosterona no citoplasma das EP e avaliar se este hormônio é mantido nestas células via receptor de andrógeno (AR) ou proteínas ligantes deste hormônio (SHBG/ABP). Além disso, será também proposto avaliar a atividade mitótica (PCNA) das EP em períodos sazonais distintos, bem como a possível participação da aromatase e, portanto, do estrógeno, nestas células. Sendo assim, dezesseis rãs-touro adultas do sexo masculino serão coletadas no inverno (GI; n=8) e verão (GV; n=8). Os testículos serão fixados e processados para inclusão em historesina e parafina. Nos cortes de parafina, serão realizadas as reações imuno-histoquímicas para a detecção de: GFRalfa-1 (para comprovar se as EP são células-tronco), SHBG/ABP, AR, aromatase e PCNA. A atividade mitótica das EP será avaliada pela quantificação do número de EP/mm2 de lóbulo seminífero, bem como pelo número de EP PCNA-positivas. Alguns fragmentos testiculares serão processados para a microscopia eletrônica de transmissão. Nos cortes ultrafinos, será realizada a reação imunocitoquímica para detecção de testosterona a fim de avaliar a localização deste hormônio no citoplasma das espermatogônias primordiais. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
KOSHIMIZU, JULIANA Y.; BELTRAME, FLAVIA L.; DE PIZZOL, JR., JOSE P.; CERRI, PAULO S.; CANEGUIM, BRENO H.; SASSO-CERRI, ESTELA. NF-kB overexpression and decreased immunoexpression of AR in the muscular layer is related to structural damages and apoptosis in cimetidine-treated rat vas deferens. Reproductive Biology and Endocrinology, v. 11, APR 9 2013. Citações Web of Science: 14.
CANEGUIM, BRENO HENRIQUE; DA LUZ, JULIANA SILVA; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; CERRI, PAULO SERGIO; SASSO-CERRI, ESTELA. Immunoexpression of aromatase and estrogen receptors beta in stem spermatogonia of bullfrogs indicates a role of estrogen in the seasonal spermatogonial mitotic activity. General and Comparative Endocrinology, v. 182, p. 65-72, FEB 1 2013. Citações Web of Science: 13.
CANEGUIM, BRENO HENRIQUE; BELTRAME, FLAVIA LUCIANA; DA LUZ, JULIANA SILVA; VALENTINI, SANDRO ROBERTO; CERRI, PAULO SERGIO; SASSO-CERRI, ESTELA. Primordial Germ Cells (Spermatogonial Stem Cells) of Bullfrogs Express Sex Hormone-Binding Globulin and Steroid Receptors during Seasonal Spermatogenesis. Cells Tissues Organs, v. 197, n. 2, p. 136-144, 2013. Citações Web of Science: 6.

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