Efeitos do hormônio sexual feminino (17-beta-estradiol) sobre a morfofisiologia testicular de anuros: Lithobates catesbeianus (Ranidae) e Rhinella schneideri (Bufonidae)

• Processo: 09/13925-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de fevereiro de 2010
• Data de Término da vigência: 31 de janeiro de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Morfologia - Anatomia
• Pesquisador responsável: Classius de Oliveira
• Beneficiário: Classius de Oliveira
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Assunto(s): Reprodução Hormônios sexuais femininos Disruptores endócrinos Estradiol Rhinella schneideri Lithobates catesbeianus Testículo Vitelogeninas
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Desreguladores endócrinos | estradiol | Lithobates catesbeianus | órgão de Bidder | Rhinella schneideri | Testículo | Biologia da Reprodução (Morfologia de Grupos Recentes)

Resumo

Diversos fatores ambientais podem afetar o tamanho das populações dos organismos, entretanto, pelas características específicas dos anfíbios, como permeabilidade da pele e ciclo de vida dependente de ambiente aquático e terrestre, estes são muito vulneráveis às variações ambientais, uma das razões para serem reconhecidos como bioindicadores ambientais. A exposição aos desreguladores endócrinos pode ser responsável por alterações morfofisiológicas em animais no ambiente natural e em condições laboratoriais, incluindo alterações nos níveis de vitelogenina (VTG), alteração na atividade de enzimas de biotransformação de xenobióticos, feminização, indução ao hermafroditismo, inibição no desenvolvimento das gônadas e declínio na reprodução. Há esforços a fim de determinar quais substâncias podem ser classificadas como desreguladores endócrinos e, principalmente, quais as concentrações que não provocam os efeitos relatados. Assim, a primeira etapa do projeto visa avaliar os efeitos do composto 17-²-estradiol (em concentrações de 500 e 1000mL/Kg corporal) na rã-touro, L. catesbeianus (provenientes de ranicultura - UNESP-Jaboticabal). O hormônio será aplicado em dias alternados durante o período de 40 dias, por meio de injeções subcutâneas (avaliação de respostas em longo prazo). Outro experimento para avaliação de respostas rápidas, será administrada uma concentração de 1000 mL/Kg dissolvido em 0,05 ml em óleo vegetal. O hormônio será aplicado por uma semana uma vez por dia, sendo analisados após esse período. Serão utilizados cinco animais para cada grupo controle, os quais receberão injeções subcutâneas apenas de óleo vegetal. Este modelo simulará o que se constata atualmente, ou seja, compostos estrogênicos são naturalmente e diariamente excretados na urina e descartados no ambiente através do esgoto doméstico. Existe ainda um evidente interesse econômico no que se refere ao conhecimento sobre a fisiologia da rã-touro. Para cumprir os propósitos serão realizadas análises estereológicas e morfológicas gerais do testículo, e no fígado, a avaliação da atividade do citocromo P450 (isoforma EROD) e da atividade de GST. A segunda etapa do projeto visa analisar morfofisiologicamente os testículos e o órgão de Bidder de machos de R. schneideri frente a injeções desse hormônio sexual feminino. A espécie pertence à família Bufonidae e em ambos os sexos apresentam o órgão de Bidder, estrutura que produz células germinativas femininas. Este órgão se localiza na extremidade cranial dos testículos e é uma massa de tecido ovariano vestigial que em certas circunstâncias podem se tornar funcional; na literatura, é tratado como um ovário rudimentar. Apesar de ter sido descrito há décadas, informações morfofisiológicas são escassas. Baseando-se nestes aspectos propomos estimular o órgão com aplicação de 17-²-estradiol e descrevê-lo em seu aspecto anatômico, bem como avaliar o desenvolvimento morfológico das células germinativas femininas e masculinas em machos. Serão coletados em lagoas permanentes na região de São José do Rio Preto durante o período reprodutivo e ambietalizados em terrário. Os animais serão tratados com o hormônio (concentração de 1mg/kg) aplicado por via subcutânea em dias alternados; serão analisados após um período de 15 dias (Grupo 1) e 30 dias (Grupo 2) de tratamento. Especificamente: a) realizar análises biométricas do órgão de Bidder e dos testículos após o uso do hormônio; b) descrever histologicamente as células de linhagem germinativa do órgão de Bidder e dos testículos; c) estimular o funcionamento e produção de células germinativas femininas do órgão de Bidder através da injeção de hormônio; d) realizar análises morfométricas do tecido germinativo do órgão de Bidder e das gônadas para os diferentes tempos de tratamentos hormonais. Pesquisas desta natureza apresentam contribuições relevantes sobre a biologia reprodutiva desses animais, visando esclarecer alguns aspectos morfológicos e fisiológicos ainda indeterminados. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SILBERSCHMIDT FREITAS, J.; FRANCO-BELUSSI, L.; DE OLIVEIRA, C.. Morphological and histochemical studies of Bidder's organ in Rhinella schneideri (Amphibia: Anura) males. ITALIAN JOURNAL OF ZOOLOGY, v. 82, n. 4, p. 479-488, OCT 2 2015. (09/13925-7, 09/50956-8, 10/12939-1, 11/01840-7)

ZIERI, RODRIGO; FRANCO-BELUSSI, LILIAN; DE SOUZA SANTOS, LIA RAQUEL; TABOGA, SEBASTIAO ROBERTO; DE OLIVEIRA, CLASSIUS. Sex hormones change visceral pigmentation in Eupemphix nattereri (Anura): effects in testicular melanocytes and hepatic melanomacrophages. ANIMAL BIOLOGY, v. 65, n. 1, p. 21-32, 2015. (09/13925-7, 05/02919-5, 14/00946-4)

FRANCO-BELUSSI, LILIAN; DE OLIVEIRA, CLASSIUS. Lipopolysaccharides induce changes in the visceral pigmentation of Eupemphix nattereri (Anura: Leiuperidae). ZOOLOGY, v. 114, n. 5, p. 298-305, OCT 2011. (09/13925-7, 08/52389-0)

FRANCO-BELUSSI, LILIAN; DE LAURO CASTRUCCI, ANA MARIA; DE OLIVEIRA, CLASSIUS. Responses of melanocytes and melanomacrophages of Eupemphix nattereri (Anura: Leiuperidae) to Nle(4), D-Phe(7)-alpha-melanocyte stimulating hormone and lipopolysaccharides. ZOOLOGY, v. 116, n. 5, p. 316-324, OCT 2013. (09/13925-7, 08/52389-0, 11/01840-7)

FRANCO-BELUSSI, LILIAN; DE SOUZA SANTOS, LIA RAQUEL; ZIERI, RODRIGO; VICENTINI, CARLOS ALBERTO; TABOGA, SEBASTIAO ROBERTO; DE OLIVEIRA, CLASSIUS. Liver Anatomy, Histochemistry, and Ultrastructure of Eupemphix nattereri (Anura: Leiuperidae) During the Breeding Season. ZOOLOGICAL SCIENCE, v. 29, n. 12, p. 844-848, DEC 2012. (09/13925-7, 08/52389-0, 11/01840-7)

FRANCO-BELUSSI, LILIAN; LEITE, GABRIELA BARONI; FREITAS, JULIANE SILBERSCHMIDT; DE OLIVEIRA, CLASSIUS. Morphological effects of bacterial compounds on the testes of Eupemphix nattereri (Anura). ANIMAL BIOLOGY, v. 64, n. 3, p. 261-275, 2014. (09/13925-7, 13/02067-5, 11/01840-7)

FRANCO-BELUSSI, L.; SILBERSCHMITD FREITAS, J.; OLIVEIRA, C.. Visceral colouration of Eupemphix nattereri (Anura: Leiuperidae): effects of NDP-alpha-melanocyte stimulating hormone. ITALIAN JOURNAL OF ZOOLOGY, v. 80, n. 3, p. 364-372, SEP 1 2013. (09/13925-7, 05/02919-5, 11/01840-7)