Busca avançada
Ano de início
Entree
Conteúdo relacionado

Expressão de proteínas de interesse comercial obtida da hemolinfa de Lonomia obliqua em sistema de células de inseto/Baculovirus

Processo: 08/57263-5
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de março de 2009 - 31 de agosto de 2011
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Ronaldo Zucatelli Mendonca
Beneficiário:Ronaldo Zucatelli Mendonca
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo, SP, Brasil
Assunto(s):Biotecnologia  Hemolinfa  Apoptose  Expressão de proteínas  Antivirais 

Resumo

Recentemente, temos identificado e isolado proteínas de interesse farmacológico e biotecnológico da hemolinfa de Lonomia obliqua. Este projeto é uma continuação dessas pesquisas. Nestes estudos, duas proteínas têm um interesse mais relevante, uma delas com ação antiviral (Fapesp 06/02108-0) e uma segunda com atividade antiapoptótica (FAPESP 01/09040-8). Com base nesses estudos anteriores, os principais objetivos do presente projeto são: a) construir um sistema de expressão das duas proteínas, em células de Spodoptera frugiperda e em baculovírus (Sf9/baculovírus). b) desenvolver um protocolo de cultivo das células Sf9/baculovírus para expressão em escala laboratorial (20-50 mL) das duas proteínas, verificando a funcionalidade da proteína e realizando a caracterização bioquímica destas proteínas. Este estudo será realizado em duas etapas. Numa primeira etapa, as proteínas serão isoladas da hemolinfa de Lonomia obiqua através de técnicas cromatográficas e testadas em cultivos celulares para verificar a atividade biológica. As frações de interesse serão separadas quantificadas. Nesta etapa utilizaremos eletroforese em gel de poliacrilamida bidimensional (2D) para análise das proteínas, determinação da seqüência N-terminal das proteínas purificadas e espectrometria de massa. Numa segunda etapa, será feita a construção do vetor baculovírus com o gene de interesse, a transfecção celular, a produção em quantidades convenientes através de técnicas de cultivo celular, a purificação e a caracterização das proteínas obtidas. (AU)

Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre o auxílio:
Proteína de lagarta age contra vírus do sarampo e H1N1 
Mapa da distribuição dos acessos desta página
Para ver o sumário de acessos desta página, clique aqui.