Busca avançada
Ano de início
Entree

Investigações funcionais e estruturais dos mecanismos moleculares envolvidos na sinalização, regulação e ativação das miosinas Classe V

Processo: 09/08312-6
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de fevereiro de 2010 - 31 de julho de 2012
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Biofísica - Biofísica Molecular
Pesquisador responsável:Mário Tyago Murakami
Beneficiário:Mário Tyago Murakami
Instituição-sede: Laboratório Nacional de Luz Síncrotron (LNLS). Centro Nacional de Pesquisa em Energia e Materiais (CNPEM). Ministério da Ciência, Tecnologia, Inovações e Comunicações (Brasil). Campinas , SP, Brasil
Assunto(s):Cristalografia  Miosina tipo V  Espalhamento de raios X a baixos ângulos 

Resumo

A miosina V, amplamente distribuída em sistemas eucarióticos desde leveduras até vertebrados, é um dos mais caracterizados motores moleculares da superfamília das miosinas e desempenha um papel chave no transporte vetorial intracelular de vesículas, organelas, RNA mensageiro e lipideos através dos microfilamentos de actina. Miosina Va (MVa), um dos três paralogos da miosina V, é abundante em melanócitos e células nervosas e a sua deleção gênica ou mutação resulta em disordens na pigmentação, falha no transporte de melanossoma, defeitos neurológicos e em poucas semanas leva a morte. Em humanos, defeitos na MVa ou em proteínas adaptoras entre a MVa e os cargos resultam na síndrome de Griscelli que é caracterizada por desordens na pigmentação e sintomas neurológicos assim como observado em ratos. A MVa consiste de duas cadeias pesadas idênticas que dimeriza através da formação de uma estrutura coiled-coil e sua arquitetura tridimensional pode ser dividida em três distintos domínios: a porção N-terminal ou domínio motor que apresenta os sítios de interação com ATP e actina; a porção central ou pescoço formada por 6 domínios IQ, responsável pela regulação e interação com calmodulina; e a porção C-terminal que inclui a região coiled-coil e o domínio de ligação à cargos também conhecido como cauda globular. Uma das mais importantes questões pertinentes até hoje é como ocorre a sinalização e a interação entre as vesículas/organelas e o domínio globular C-terminal da MVa. Sabe-se que a fosforilação da Ser1650 por uma quinase, dependente da calmodulina, tipo II (CaMK-II) resulta na liberação das organelas pela MVa, porém não se compreende os determinantes estruturais envolvidos nesse processo. Além disso, a especificidade e interação com outros tipos de cargos é dependente de proteínas adaptoras como as Rabs que pertencem a superfamília das GTPases de baixo peso molecular. Assim, neste projeto visamos estudar os mecanismos de sinalização e regulação do domínio globular da MVa que está diretamente envolvido na ligação com cargos e na estabilização da conformação inibida; via estudos funcionais, por duplo híbrido em levedura para identificação de alvos, e principalmente, via estudos estruturais por cristalografia e SAXS do domínio globular nativo, fosforilado e em complexo com proteínas adaptoras como as Rabs. (AU)

Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ASSIS, L. H. P.; SILVA-JUNIOR, R. M. P.; DOLCE, L. G.; ALBORGHETTI, M. R.; HONORATO, R. V.; NASCIMENTO, A. F. Z.; MELO-HANCHUK, T. D.; TRINDADE, D. M.; TONOLI, C. C. C.; SANTOS, C. T.; OLIVEIRA, P. S. L.; LARSON, R. E.; KOBARG, J.; ESPREAFICO, E. M.; GIUSEPPE, P. O.; MURAKAMI, M. T. The molecular motor Myosin Va interacts with the cilia-centrosomal protein RPGRIP1L. SCIENTIFIC REPORTS, v. 7, MAR 7 2017. Citações Web of Science: 15.
DE GIUSEPPE, PRISCILA OLIVEIRA; CAMPOS BRASIL SOUZA, TATIANA DE ARRUDA; MOREIRA SOUZA, FLAVIO HENRIQUE; ZANPHORLIN, LETICIA MARIA; MACHADO, CARLA BOTELHO; WARD, RICHARD JOHN; JORGE, JOAO ATILIO; MELO FURRIEL, ROSA DOS PRAZERES; MURAKAMI, MARIO TYAGO. Structural basis for glucose tolerance in GH1 beta-glucosidases. ACTA CRYSTALLOGRAPHICA SECTION D-BIOLOGICAL CRYSTALLOGRAPHY, v. 70, n. 6, p. 1631-1639, JUN 2014. Citações Web of Science: 51.
ALVAREZ, THABATA M.; PAIVA, JOICE H.; RUIZ, DIEGO M.; CAIRO, JOAO PAULO L. F.; PEREIRA, ISABELA O.; PAIXAO, DOUGLAS A. A.; DE ALMEIDA, RODRIGO F.; TONOLI, CELISA C. C.; RULLER, ROBERTO; SANTOS, CAMILA R.; SQUINA, FABIO M.; MURAKAMI, MARIO T. Structure and Function of a Novel Cellulase 5 from Sugarcane Soil Metagenome. PLoS One, v. 8, n. 12 DEC 17 2013. Citações Web of Science: 21.
NASCIMENTO, ANDREY F. Z.; TRINDADE, DANIEL M.; TONOLI, CELISA C. C.; DE GIUSEPPE, PRISCILA O.; ASSIS, LEANDRO H. P.; HONORATO, RODRIGO V.; DE OLIVEIRA, PAULO S. L.; MAHAJAN, PRAVIN; BURGESS-BROWN, NICOLA A.; VON DELFT, FRANK; LARSON, ROY E.; MURAKAMI, MARIO T. Structural Insights into Functional Overlapping and Differentiation among Myosin V Motors. Journal of Biological Chemistry, v. 288, n. 47, p. 34131-34145, NOV 22 2013. Citações Web of Science: 16.

Por favor, reporte erros na lista de publicações científicas escrevendo para: cdi@fapesp.br.