Participação da proteína tirosina quinase Src e do óxido nítrico nas vias de sinalização celular estimuladas por estrógeno em linhagens de tumores humanos de mama

• Processo: 10/19013-7
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de fevereiro de 2011 - 31 de janeiro de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Metabolismo e Bioenergética
• Pesquisador responsável: Hugo Pequeno Monteiro
• Beneficiário: Hugo Pequeno Monteiro
• Instituição Sede: Centro de Terapia Celular e Molecular. Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Diogo de Oliveira Silva ; Wagner Luiz Batista
• Assunto(s): Transdução de sinais S-nitrosação Receptores de estrogênio Óxido nítrico Neoplasias mamárias Estrógenos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | estrógeno | Oxido Nitrico | Receptor de estrógeno | s-nitrosilação | Src quinase | Sinalização Celular

Resumo

Src quinase é uma proteína tirosina quinase citoplasmática que tem papel fundamental em inúmeros processos celulares como proliferação, migração e transformação. A fosforilação em tirosina associada a modificações pós-tradução de natureza redox (ex: nitrosilação, oxidação, etc.) determinam as vias de sinalização celular mediadas e/ou facilitadas por Src quinase. Nosso grupo descreveu recentemente a S-nitrosilação de Src em fibroblastos de camundongo e em células de carcinoma mamário humano, MCF-7, por fontes exógenas e endógenas de óxido nítrico (NO). O NO tem uma função central na tumorigênese, particularmente no que concerne à capacidade de invasão e metástase tumorais. Células MCF-7 são responsivas a estrógenos por possuírem receptor de estrógeno (ER). Os estrógenos são moléculas importantes que regulam vários processos fisiológicos, incluindo crescimento, proliferação e diferenciação celular, além da migração e formação de novos vasos sanguíneos; entretanto, também está envolvido em processos patológicos, como o câncer de mama. Várias evidências indicam que em células MCF-7 Src quinase ativa a fosfatidilinositol 3 quinase (PI3K) cujo principal alvo é a proteína Akt, que leva à rápida ativação da enzima óxido nítrico sintase endotelial (eNOS), responsável pela liberação NO no lúmen vascular. Não se conhece a relação entre estas duas vias importantes de sinalização celular associadas à progressão destes tumores. Para realizar este objetivo iremos caracterizar os componentes da via de sinalização envolvendo a S-nitrosilação de Src em células MCF-7. Para tanto, nós pretendemos clonar, expressar e purificar Src quinase recombinante com um "tag" de 6 histidinas (6xHis); o "tag" de histidina tornará possível a purificação de um complexo multiprotéico, 6xHis-Src-proteínas, após estímulo com estrógeno (17b-estradiol). Este complexo multiprotéico será estudado através das técnicas de Western Blot/Imunoprecipitação e Espectrometria de Massas. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

DA COSTA, PAULO E.; BATISTA, WAGNER L.; MORAES, MIRIAM S.; STERN, ARNOLD; MONTEIRO, HUGO P.. Src kinase activation by nitric oxide promotes resistance to anoikis in tumour cell lines. Free Radical Research, v. 52, n. 5, p. 592-604, 2018. (11/24112-7, 10/19013-7)

MONTEIRO, HUGO P.; COSTA, PAULO E.; REIS, ADRIANA K. C. A.; STERN, ARNOLD. Nitric oxide: Protein tyrosine phosphorylation and protein S-nitrosylation in cancer. BIOMEDICAL JOURNAL, v. 38, n. 5, p. 380-388, SEP-OCT 2015. (10/19013-7, 13/16644-4, 12/10470-1)

MORAES, MIRIAM S.; COSTA, PAULO E.; BATISTA, WAGNER L.; PASCHOALIN, TAYSA; CURCIO, MARLI F.; BORGES, ROBERTA E.; TAHA, MURCHED O.; FONSECA, FABIO V.; STERN, ARNOLD; MONTEIRO, HUGO P.. Endothelium-derived nitric oxide (NO) activates the NO-epidermal growth factor receptor-mediated signaling pathway in bradykinin-stimulated angiogenesis. Archives of Biochemistry and Biophysics, v. 558, p. 14-27, SEP 15 2014. (10/19013-7, 12/10470-1, 07/59617-6)

ELLER-BORGES, ROBERTA; BATISTA, WAGNER L.; DA COSTA, PAULO E.; TOKIKAWA, RITA; CURCIO, MARLI F.; STRUMILLO, SCHEILLA T.; SARTORI, ADRIANO; MORAES, MIRIAM S.; DE OLIVEIRA, GRACIELE A.; TAHA, MURCHED O.; et al. Ras, Rac1, and phosphatidylinositol-3-kinase (PI3K) signaling in nitric oxide induced endothelial cell migration. NITRIC OXIDE-BIOLOGY AND CHEMISTRY, v. 47, p. 40-51, MAY 1 2015. (10/19013-7, 11/14392-2, 09/52730-7)