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Ação genômica e não genômica da triiodotironina (t3) na expressão gênica e protéica da leptina e adiponectina em células 3t3-l1

Resumo

A leptina e a adiponectina são adipocinas produzidas e secretadas pelos adipócitos, sendo que a leptina age no hipotálamo como sinal de saciedade e, deste modo, controla o peso corporal. A adiponectina aumenta a oxidação muscular dos ácidos graxos e reduz a concentração de glicose plasmática através do AMPK (adenina monofosfato quinase). Os hormônios tireoidianos (HT) estão essencialmente envolvidos na regulação do gasto energético e mantém uma relação ainda não completamente elucidada na regulação da expressão gênica e protéica da leptina. No que concerne a adiponectina, alguns estudos sugerem que a função tireoideana exerce influência sobre seus níveis séricos. A hipótese desse projeto é que o T3 age de forma não genômica sobre a expressão e secreção da leptina e adiponectina. Assim este trabalho tem como objetivo verificar a ação genômica e/ou não genômica de diferentes concentrações de T3 sobre a expressão gênica (mRNA) e protéica de leptina e adiponectina, em cultura de células 3T3-L1. Utilizaremos células embrionárias 3T3-L1, com características de pré-adipócitos, para avaliarmos se o T3 atua de forma genômica (efeito em horas) ou não genômica (efeito em minutos) sobre a regulação da expressão gênica e protéica da leptina e adiponectina. Também serão avaliadas as doses de T3 que realizam estas ações. Estas células serão diferenciadas em adipócitos, e tratadas com diferentes concentrações de T3 : 10-8 M, 10-7 M e 10-6 M, e em diferentes tempos: 15 e 30 minutos, 1, 2, 6, 12 , 24 e 48 horas. Nos tempos 15 e 30 minutos, 1 e 2 horas os grupos passarão pelos mesmos tratamentos na presença de Actinomicina D (5.0 pg/ml), inibidor da síntese de mRNA, para verificar se a expressão das adipocinas são dependentes da expressão gênica celular. Os grupos também serão submetidos ao tratamento com cicloexamida (50mM), inibidor da expressão protéica. Após o tratamento hormonal será avaliada a expressão gênica da leptina, adiponectina e dos receptores de HT (TR± e ²) por meio de RT-PCR em tempo real, também será verificada a expressão protéica das adipocinas por meio de Western blot. Se a via de ação do T3 for não genômica realizaremos a expressão protéica de ERK1/ERK2, p38 fosforiladas e não fosforiladas, através de Western Blot. (AU)

Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre o auxílio:

Publicações científicas (6)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MATHIAS, LUCAS SOLLA; RODRIGUES, BRUNA MORETTO; GONCALVES, BIANCA MARIANI; FONTES MORETTO, FERNANDA CRISTINA; CASTRO OLIMPIO, REGIANE MARQUES; DEPRA, IGOR; DE SIBIO, MARIA TERESA; TILLI, HELENA PAIM; NOGUEIRA, CELIA REGINA; DE OLIVEIRA, MIRIANE. Triiodothyronine activated extranuclear pathways upregulate adiponectin and leptin in murine adipocytes. Molecular and Cellular Endocrinology, v. 503, MAR 1 2020. Citações Web of Science: 0.
DE OLIVEIRA, MIRIANE; RODRIGUES, BRUNA MORETTO; CASTRO OLIMPIO, REGIANE MARQUES; MATHIAS, LUCAS SOLLA; DE SIBIO, MARIA TERESA; FONTES MORETTO, FERNANDA CRISTINA; GRACELI, JONES BERNARDES; NOGUEIRA, CELIA REGINA. Adiponectin and Serine/Threonine Kinase Akt Modulation by Triiodothyronine and/or LY294002 in 3T3-L1 Adipocytes. LIPIDS, v. 54, n. 2-3, p. 133-140, FEB-MAR 2019. Citações Web of Science: 3.
DE OLIVEIRA, MIRIANE; DE SIBIO, MARIA TERESA; CASTRO OLIMPIO, REGIANE MARQUES; FONTES MORETTO, FERNANDA CRISTINA; MELO LUVIZOTTO, RENATA DE AZEVEDO; NOGUEIRA, CELIA REGINA. Triiodothyronine modulates the expression of leptin and adiponectin in 3T3-L1 adipocytes. Einstein (São Paulo), v. 13, n. 1, p. 72-78, JAN-MAR 2015. Citações Web of Science: 6.
DE OLIVEIRA, MIRIANE; CASTRO OLIMPIO, REGIANE MARQUES; DE SIBIO, MARIA TERESA; FONTES MORETTO, FERNANDA CRISTINA; MELLO LUVIZOTTO, RENATA DE AZEVEDO; NOGUEIRA, CELIA REGINA. Short-term effects of triiodothyronine on thyroid hormone receptor alpha by PI3K pathway in adipocytes, 3T3-L1. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia, v. 58, n. 8, p. 833-837, NOV 2014. Citações Web of Science: 1.
DE OLIVEIRA, MIRIANE; MELO LUVIZOTTO, RENATA DE AZEVEDO; CASTRO OLIMPIO, REGIANE MARQUES; DE SIBIO, MARIA TERESA; CONDE, SANDRO JOSE; RODRIGUES SILVA, CAROLINA BIZ; FONTES MORETTO, FERNANDA CRISTINA; NOGUEIRA, CELIA REGINA. Triiodothyronine Increases mRNA and Protein Leptin Levels in Short Time in 3T3-L1 Adipocytes by PI3K Pathway Activation. PLoS One, v. 8, n. 9 SEP 18 2013. Citações Web of Science: 10.
DE OLIVEIRA, MIRIANE; MELO LUVIZOTTO, RENATA DE AZEVEDO; CASTRO OLIMPIO, REGIANE MARQUES; DE SIBIO, MARIA TERESA; RODRIGUES SILVA, CAROLINA BIZ; CONDE, SANDRO JOSE; PADOVANI, CARLOS ROBERTO; NOGUEIRA, CELIA REGINA. Modulation of thyroid hormone receptors, TR alpha and TR beta, by using different doses of triiodothyronine (T3) at different times. Arquivos Brasileiros de Endocrinologia e Metabologia, v. 57, n. 5, p. 368-374, Jul. 2013. Citações Web of Science: 4.

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