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Lim-fa, uma molécula quimérica para detecção de padrões de glicosilação aberrante em tumores

Processo: 04/08060-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Programa de Apoio à Propriedade Intelectual (PAPI/Nuplitec)
Vigência: 01 de novembro de 2004 - 30 de novembro de 2006
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina - Anatomia Patológica e Patologia Clínica
Pesquisador responsável:Roger Chammas
Beneficiário:Roger Chammas
Instituição-sede: Faculdade de Medicina (FM). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Vinculado ao auxílio:98/14247-6 - Center for Research on Cell-Based Therapy, AP.CEPID
Assunto(s):Equipamentos para diagnóstico  Glicosilação  Progressão tumoral  Imuno-histoquímica  Prognóstico  Patentes 

Resumo

Tanto a galectina-3, como os seus ligantes estão aumentados em diversos tipos de tumor. Com o objetivo de criar uma ferramenta útil no diagnóstico e/ou prognóstico de tumores, foi construída uma galectina-3 híbrida, conjugada a fosfatase alcalina (gal-3/FA). A atividade de lectina e de fosfatase alcalina da gal-3/FA foi avaliada e confirmada em ensaios de ELISA. A especificidade fina da molécula foi confirmada em ensaios de ligação direta, onde foi mostrado que ela possui a mesma especificidade da galectina-3. Em seguida, esta proteína foi utilizada na avaliação dos ligantes de galectina-3 em tecidos de origem tumoral, tendo como propósito a criação de um método diagnóstico. Realizamos ensaios de imunohistoquímica, onde espécimes de adenocarcinoma de mama ductal infiltrante foram incubados com a gal-3/FA. Nós observamos que há acúmulo de galectina-3 nas células tumorais, enquanto que os seus ligantes estão presentes no estroma. Esta ligação e inibível por lactose, confirmando a dependência de carboidratos desta interação. Estende-se a análise para diversos tipos de tumor. Verificamos uma correlação entre a expressão dos ligantes de galectina-3 e o grau de diferenciação das células dos tumores de mama, próstata e pâncreas. Observamos que à medida que os tumores se tornam menos diferenciados, tem-se diminuição da expressão dos ligantes de galectina-3. O significado clínico deste achado esta em avaliação. Gal-3/FA e útil também em outros ensaios (imuno) enzimáticos, tendo sido utilizada como sonda em ensaios de western blotting. Foi observada a diminuição dos ligantes de galectina-3 em células tratadas com inibidores de enzimas de processamento de N-glicosilação, mostrando que em parte a ligação de galectina-3 aos seus ligantes é dependente deste padrão de glicosilação. (AU)

Patente(s) depositada(s) como resultado deste projeto de pesquisa

MOLÉCULA HÍBRIDA PARA DIAGNÓSTICO E /OU PROGNÓSTICO DE DOENÇAS CRÔNICO-DEGENERATIVAS, INFECCIOSAS E DO DESENVOLVIMENTO PI0501095-0 - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) ; Universidade de São Paulo (USP) . Roger Chammas; Fabiana Henriques Machado de Melo; Diego Alberto Butera Wadsworth; Ana Maria Moura da Silva - 24 de fevereiro de 2005