Busca avançada
Ano de início
Entree

Determinação da especificidade de peptidases isoladas de fungos usando peptídeos FRET como substratos

Processo: 11/06986-0
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de agosto de 2011 - 31 de janeiro de 2014
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Enzimologia
Pesquisador responsável:Hamilton Cabral
Beneficiário:Hamilton Cabral
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Cinética enzimática  Enzimas hidrolíticas  Peptídeo hidrolases  Fungos  Fermentação 

Resumo

As peptidases podem ser obtidas a partir de bactérias, fungos, leveduras, tecidos de animais e plantas. Apesar da ampla fonte de obtenção, as peptidases microbianas desempenham um papel específico de catalisador na hidrólise de proteínas e peptídeos. Certamente é um dos grupos mais importantes de enzimas industriais responsáveis por cerca de 60% do total das vendas de enzima em todo o mundo. Apresentam aplicações nas diversas áreas, incluindo indústria farmacêutica, cosmético, alimento, papel, processamento de couro, preparação de fertilizante orgânico e componente de detergente. Os fungos filamentosos são amplamente explorados, devido à sua capacidade de crescer em grandes massas de materiais vegetais, pilhas de produtos agroindustriais e outros acúmulos de matérias orgânicas, onde o ambiente quente, úmido e aeróbio fornece as condições básicas para seu desenvolvimento e produção de uma vasta gama de produtos de interesse econômico, entre estes produtos podemos destacar as enzimas extracelulares, dentre estas as peptidases. A habilidade das peptidases em discernir dois ou mais substratos que competem entre si, é função das características físico-químicas dos subsítios desta subclasse de enzima e também dos substratos que interagem com ela. A determinação da especificidade é o primeiro passo quando se quer caracterizar novas peptidases. Substratos peptídicos com supressão intramolecular de fluorescência compreende a classe mais versátil de substratos sintéticos para peptidase disponível atualmente. Esta classe de substrato é útil para ampla aplicação na enzimologia, devido sua simplicidade, rapidez e precisão na determinação das constantes reacionais. O interesse científico em peptidases e suas ações em diferentes proteínas não somente podem resultar em melhores produtos, mas também estimular o desenvolvimento de um grande número de novas aplicações na produção de fármacos, de alimentos e seus ingredientes e em peptídeos que apresentam atividades biológicas. O presente projeto tem como objetivo realizar a produção de peptidases de origem fúngica por fermentação sólida, a purificação das peptidases, a determinação das características bioquímica funcional e estrutural e a determinação da especificidade das peptidases utilizando os substratos peptídicos com supressão intramolecular de fluorescência. Por se tratar de um projeto envolvendo a produção, purificação e caracterização de novas enzimas que possuem amplas aplicações em diversas áreas, este projeto apresenta grande potencial de novos pedidos de patentes, além dos artigos científicos que serão produzidos com os resultados obtidos. (AU)

Publicações científicas (15)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; SOUTO, TATIANE BELTRAMINI; DA ROSA, NATHALIA GONSALES; GONCALVES DE OLIVEIRA, LILIAN CAROLINE; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; ROSA, JOSE C.; CABRAL, HAMILTON. Evaluation of the milk clotting properties of an aspartic peptidase secreted by Rhizopus microsporus. PREPARATIVE BIOCHEMISTRY & BIOTECHNOLOGY, OCT 2019. Citações Web of Science: 0.
DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; DA ROSA, NATHALIA GONSALES; GONCALVES DE OLIVEIRA, LILIAN CAROLINE; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; ROSA, JOSE C.; CABRAL, HAMILTON. Biochemical Properties and Catalytic Specificity of a Novel Neutral Serine Peptidase Secreted by Fungus Pyrenochaetopsis sp.. Applied Biochemistry and Biotechnology, v. 187, n. 4, p. 1158-1172, APR 2019. Citações Web of Science: 1.
ABOU HAMIN NETO, YOUSSEF ALI; DA ROSA GARZON, NATHALIA GONSALES; PEDEZZI, RAFAEL; CABRAL, HAMILTON. Specificity of peptidases secreted by filamentous fungi. BIOENGINEERED, v. 9, n. 1, p. 30-37, 2018. Citações Web of Science: 3.
DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; GONCALVES DE OLIVEIRA, LILIAN CAROLINE; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; DE OLIVEIRA, ARTHUR H. C.; ROSA, JOSE C.; CABRAL, HAMILTON. Biochemical and milk-clotting properties and mapping of catalytic subsites of an extracellular aspartic peptidase from basidiomycete fungus Phanerochaete chrysosporium. Food Chemistry, v. 225, p. 45-54, JUN 15 2017. Citações Web of Science: 19.
HAMIN NETO, YOUSSEF A. A.; DE OLIVEIRA, LILIAN C. G.; DE OLIVEIRA, JULIANA R.; JULIANO, MARIA A.; JULIANO, LUIZ; ARANTES, ELIANE C.; CABRAL, HAMILTON. Analysis of the Specificity and Biochemical Characterization of Metalloproteases Isolated from Eupenicillium javanicum Using Fluorescence Resonance Energy Transfer Peptides. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 7, JAN 9 2017. Citações Web of Science: 0.
DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; GONCALVES DE OLIVEIRA, LILIAN CAROLINE; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; ROSA, JOSE C.; CABRAL, HAMILTON. Activity of a peptidase secreted by Phanerochaete chrysosporium depends on lysine to subsite S `(1). International Journal of Biological Macromolecules, v. 94, n. A, p. 474-483, JAN 2017. Citações Web of Science: 10.
ABOU HAMIN NETO, YOUSSEF ALI; COITINHO, LUCIANA BARBOSA; PEDRO DE FREITAS, LUIS ALEXANDRE; CABRAL, HAMILTON. Box-Behnken analysis and storage of spray-dried collagenolytic proteases from Myceliophthora thermophila submerged bioprocess. PREPARATIVE BIOCHEMISTRY & BIOTECHNOLOGY, v. 47, n. 5, p. 473-480, 2017. Citações Web of Science: 0.
IDA, ERIKA LIKA; DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; DE OLIVEIRA, TASSIO BRITO; SOUTO, TATIANE BELTRAMINI; LEITE, JULIANA ABIGAIL; RODRIGUES, ANDRE; CABRAL, HAMILTON. Biochemical properties and evaluation of washing performance in commercial detergent compatibility of two collagenolytic serine peptidases secreted by Aspergillus fischeri and Penicillium citrinum. PREPARATIVE BIOCHEMISTRY & BIOTECHNOLOGY, v. 47, n. 3, p. 282-290, 2017. Citações Web of Science: 5.
DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; SOUTO, TATIANE BELTRAMINI; DE OLIVEIRA, TASSIO BRITO; GONCALVES DE OLIVEIRA, LILIAN CAROLINE; KARCHER, DANIEL; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; DE OLIVEIRA, ARTHUR H. C.; RODRIGUES, ANDRE; ROSA, JOSE C.; CABRAL, HAMILTON. Evaluation of the catalytic specificity, biochemical properties, and milk clotting abilities of an aspartic peptidase from Rhizomucor miehei. Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology, v. 43, n. 8, p. 1059-1069, AUG 2016. Citações Web of Science: 14.
BIAGGIO, RAFAEL TAGE; DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; DA ROSA, NATHALIA GONSALES; RIBEIRO LEITE, RODRIGO SIMOES; ARANTES, ELIANE CANDIANI; DE FREITAS CABRAL, TATIANA PEREIRA; JULIANO, MARIA A.; JULIANO, LUIZ; CABRAL, HAMILTON. Purification and biochemical characterization of an extracellular serine peptidase from Aspergillus terreus. PREPARATIVE BIOCHEMISTRY & BIOTECHNOLOGY, v. 46, n. 3, p. 298-304, 2016. Citações Web of Science: 8.
HAMIN NETO, YOUSSEF A. A.; DE OLIVEIRA, LILIAN C. G.; DE OLIVEIRA, ARTHUR H. C.; ROSA, JOSE C.; JULIANO, MARIA A.; JULIANO, LUIZ; RODRIGUES, ANDRE; CABRAL, HAMILTON. Determination of Specificity and Biochemical Characteristics of Neutral Protease Isolated from Myceliophthora thermophila. PROTEIN AND PEPTIDE LETTERS, v. 22, n. 11, p. 972-982, 2015. Citações Web of Science: 6.
RODRIGUES DE SIQUEIRA, ANA CLAUDIA; DA ROSA, NATHALIA GONSALES; SOUZA MOTTA, CRISTINA MARIA; CABRAL, HAMILTON. Peptidase with Keratinolytic Activity Secreted by Aspergillus terreus During Solid-State Fermentation. Brazilian Archives of Biology and Technology, v. 57, n. 4, p. 514-522, JUL-AUG 2014. Citações Web of Science: 2.
HAMIN NETO, YOUSSEF ALI ABOU; PEDRO DE FREITAS, LUIS ALEXANDRE; CABRAL, HAMILTON. Multivariate Analysis of the Stability of Spray-Dried Eupenicillium javanicum Peptidases. Drying Technology, v. 32, n. 5, p. 614-621, APR 4 2014. Citações Web of Science: 5.
LOPES, VANESSA F.; CABRAL, HAMILTON; MACHADO, LUCIANA P. B.; MATEUS, ROGERIO P. Purification and characterization of a specific late-larval esterase from two species of the Drosophila repleta group: contributions to understand its evolution. ZOOLOGICAL STUDIES, v. 53, JAN 2014. Citações Web of Science: 2.
DA SILVA, RONIVALDO RODRIGUES; CAETANO, RENATO CESAR; OKAMOTO, DEBORA NONA; GONALVES DE OLIVEIRA, LILIAN CAROLINE; BERTOLIN, THIAGO CARLOS; JULIANO, MARIA APARECIDA; JULIANO, LUIZ; DE OLIVEIRA, ARTHUR H. C.; ROSA, JOSE C.; CABRAL, HAMILTON. The Identification and Biochemical Properties of the Catalytic Specificity of a Serine Peptidase Secreted by Aspergillus fumigatus Fresenius. PROTEIN AND PEPTIDE LETTERS, v. 21, n. 7, p. 663-671, 2014. Citações Web of Science: 14.

Por favor, reporte erros na lista de publicações científicas escrevendo para: cdi@fapesp.br.