Estudo do transcriptoma de cepas de Mycobacterium tuberculosis em células gigantes multinucleadas ativadas por vitamina A e D utilizando sequenciamento total em alta perfomance

• Processo: 11/08625-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2011
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Biologia e Fisiologia dos Microorganismos
• Pesquisador responsável: Mario Hiroyuki Hirata
• Beneficiário: Mario Hiroyuki Hirata
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCF). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Elsa Masae Mamizuka ; Raphael Bessa Parmigiani ; Rosario Dominguez Crespo Hirata
• Assunto(s): Micologia Tuberculose Mycobacterium tuberculosis Expressão gênica Macrófagos Células gigantes Sequenciamento de alta performance
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: M | Sequenciamento de alta performance | Tuberculose | tuberculosis | Micobacteriologia

Resumo

O tratamento da tuberculose é difícil e requer pelo menos seis meses de medicação. Além do desenvolvimento de multirresistencia, há um reduzido número de fármacos disponíveis para o tratamento. A capacidade de sobreviver em ambientes difíceis, incluindo o interior de macrófagos, tem sido descrita como umas das mais importantes habilidades do M. tuberculosis para infectar a raça humana. Embora importante, a expressão gênica de MTB durante esta fase de persistência ainda não está completamente elucidada. Adicionalmente, a função de RNA não codificadores nesta fase é desconhecida. Neste projeto, avaliaremos a expressão gênica global de micobactérias em contato com macrófagos gigantes multinucleados in vitro cultivados com suplemento de vitamina A e D. Possíveis funções de RNA não codificadores na persistência micobacteriana também serão analisadas. Células gigantes multinucleadas serão infectadas com micobactérias e analisadas por um período de 30 dias. As mycobactérias serão isoladas das células eucariotas e o RNA total será extraído e sequenciados no Sistema Solid XL 5500 de alta performance. Os perfis da expressão gênica de M. tuberculosis W-beijing, M. tuberculosis H37Rv e de um isolado clínico não beijing multirresistente serão analisados e comparados. Espera-se que os resultados obtidos forneçam novas informações sobre a biologia de mycobacterias persistentes. Este estudo também ajudará a entender como adaptações fisiológicas exigidas na persistência micobacteriana são variáveis entre diferentes grupos e como essas adaptações contribuem para o desenvolvimento da doença. Por fim, novos alvos moleculares para desenvolvimento de fármacos e novos genes envolvidos nesta fase serão envidenciados. (AU)