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Quimerismo embrionário nas espécies murina e bovina: interação da massa celular interna, de embriões produzidos in vivo, com embriões receptores produzidos in vitro

Processo: 06/06491-2
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Apoio a Jovens Pesquisadores
Vigência: 01 de fevereiro de 2008 - 31 de janeiro de 2012
Área do conhecimento:Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
Pesquisador responsável:Marcelo Fábio Gouveia Nogueira
Beneficiário:Marcelo Fábio Gouveia Nogueira
Instituição-sede: Faculdade de Ciências e Letras (FCL-ASSIS). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Assis. Assis , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):11/18170-4 - Derivação de células tronco embrionárias, com a utilização de inibidores MEK1 e GSK3, a partir de embriões de camundongo ativados partenogeneticamente, BP.IC
11/12626-6 - Utilização das técnicas de análise de agrupamentos e de redes neurais artificiais para a predição do resultado de fêmeas de camundongos submetidas ao tratamento superestimularório, BP.IC
11/06179-7 - Uso de Redes Neurais Artificiais na determinação da viabilidade e da qualidade de embriões de camundongos, BP.IC
+ mais bolsas vinculadas 11/01119-6 - Avaliação da expressão gênica do receptor do hormônio luteinizante (LHR) em embriões de camundongos e bovinos, BP.IC
10/19892-0 - Agregação in vitro de embriões de camundongo produzidos in vivo com partenogenotos diplóides, BP.IC
09/04888-0 - Produção de quimeras embrionárias bovinas mediante a agregação de embriões diplóides (Bos taurus) e tetraplóides (Bos indicus), BP.MS
09/10679-5 - Avaliação da exeqüibilidade da técnica e da taxa de gestação de quimeras bovinas: agregação entre o trofectoderma, produzido in vivo, com a massa celular interna oriunda da produção in vitro ou de raça termossensível, BP.DR
09/17605-7 - Quimerismo por Agregação de Hemiblastocistos de Camundongos: Influência da Quantidade de Células na Eficácia da Técnica., BP.IC
09/15919-4 - Derivação de linhagem de células-tronco embrionárias fluorescentes verdes, oriundas de camundongo C57BL/6/EGFP, BP.IC
09/16254-6 - "Obtenção de quimeras murinas mediante a microinjeção de células pluripotentes fluorescentes verdes em blastocistos receptores", BP.IC
07/07705-9 - Quimerismo embrionario nas especies murina e bovina: interacao da massa celular interna, de embrioes produzidos in vivo, com embrioes receptores produzidos in vitro., BP.JP - menos bolsas vinculadas
Assunto(s):Células-tronco embrionárias  Embrião de animal  Bovinos  Fertilização in vitro 
Publicação FAPESP:http://media.fapesp.br/bv/uploads/pdfs/Investindo...pesquisadores_26_63_64.pdf

Resumo

Células-tronco embrionárias (ESC) tem sido utilizadas nas tentativas da obtenção de tecidos específicos ou mesmo de indivíduos. Devido à plasticidade destas células - por possuírem uma pluripotência na geração de tipos celulares provenientes das 3 camadas germinativas (ectoderme, mesoderme e endoderme) - uma das possibilidades poderia ser o estabelecimento de linhagens permanentes de ESC oriundas de embriões com um histórico reprodutivo superior (isto é, provenientes de doadoras com médias de produção de embriões e/ou taxas de gestação aliados à superioridade fenotípica de sua progênie). Estas linhagens poderiam ser utilizadas na geração de animais quiméricos e/ou de animais clonados por transferência de núcleo (NT). Assim, a obtenção, caracterização da pluripotência e perpetuação de tais linhagens, poderiam abrir interessantes perspectivas quanto à biotecnologia da reprodução assistida em bovinos. Na produção de embriões quiméricos, uma possibilidade seria a manipulação da relação entre as populações de ESC e da massa celular interna (ICM) do embrião receptor, com o intuito de aumentar – ou mesmo substituir integralmente – a participação das ESC na formação das gônadas do indivíduo. Com esse intuito, serão utilizados embriões murinos e bovinos (produzidos in vivo e in vitro, respectivamente) como receptores da ICM, oriunda de embriões obtidos in vivo ou de partenogenotos, na indução do quimerismo das gônadas. Os embriões doadores das ICM serão obtidos de camundongos transgênicos GFP ou de vacas da raça Nelore. Será testada a metodologia de redução - e mesmo de exclusão - da ICM do embrião receptor, como favorecimento à incorporação e povoamento da ICM oriunda dos embriões doadores (no caso extremo, o embrião receptor contribuiria somente com o trofectoderma, sendo toda a ICM oriunda do embrião doador). Será utilizada a transfecção da ICM, com EGFP, para a determinação in vitro da eficácia do quimerismo embrionário na espécie bovina. Um dos objetivos deste projeto é adquirir conhecimento básico no estabelecimento de linhagens auto-renováveis de células-tronco embrionárias, oriundas de embriões bovinos (produzidos in vivo e mediante partenogênese) a partir de fêmeas selecionadas com base no seu histórico reprodutivo e/ou produtivo. Além disso, será investigada a eficácia na obtenção de fêmeas bovinas quiméricas, e sua caracterização quanto ao grau de quimerismo presente nos ovários. Embora este projeto possua um fundamento na pesquisa básica, em sua estrutura conceitual existe uma profunda ênfase nas aplicações, práticas e comerciais, decorrentes do domínio das técnicas propostas no presente projeto. Algumas dessas aplicações poderiam ser a manipulação gênica de tais linhagens de ESC – relacionadas às características de produção, reprodução e resistência – ou na incorporação de transgenes nessas linhagens. Tais modificações no genótipo das ESC, associado à clonagem por NT, poderiam resultar em fontes inesgotáveis de matéria-prima na construção de biorreatores bovinos. Finalmente, a implementação de um pólo de biotecnologia animal na UNESP, no Campus de Assis, será uma forte base de sustentação e nucleação científica para o recém-criado curso de graduação em Biotecnologia. (AU)

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Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ROCHA, JOSE CELSO; PASSALIA, FELIPE JOSE; MATOS, FELIPE DELESTRO; TAKAHASHI, MARIA BEATRIZ; MASERATI, JR., MARC PETER; ALVES, MAYRA FERNANDA; DE ALMEIDA, TAMIE GUIBU; CARDOSO, BRUNA LOPES; BASSO, ANDREA CRISTINA; GOUVEIA NOGUEIRA, MARCELO FABIO. Automatized image processing of bovine blastocysts produced in vitro for quantitative variable determination. SCIENTIFIC DATA, v. 4, DEC 19 2017. Citações Web of Science: 4.
ROCHA, JOSE CELSO; PASSALIA, FELIPE JOSE; MATOS, FELIPE DELESTRO; TAKAHASHI, MARIA BEATRIZ; CINICIATO, DIEGO DE SOUZA; MASERATI, MARC PETER; ALVES, MAYRA FERNANDA; DE ALMEIDA, TAMIE GUIBU; CARDOSO, BRUNA LOPES; BASSO, ANDREA CRISTINA; GOUVEIA NOGUEIRA, MARCELO FABIO. A Method Based on Artificial Intelligence To Fully Automatize The Evaluation of Bovine Blastocyst Images. SCIENTIFIC REPORTS, v. 7, AUG 9 2017. Citações Web of Science: 9.
ROCHA, JOSE C.; PASSALIA, FELIPE; MATOS, FELIPE D.; MASERATI, JR., MARC P.; ALVES, MAYRA F.; DE ALMEIDA, TAMIE G.; CARDOSO, BRUNA L.; BASSO, ANDREA C.; NOGUEIRA, MARCELO F. G. Methods for assessing the quality of mammalian embryos: How far we are from the gold standard?. JORNAL BRASILEIRO DE REPRODUCAO ASSISTIDA, v. 20, n. 3, p. 150-158, JUL-SEP 2016. Citações Web of Science: 6.
RAZZA, EDUARDO M.; SATRAPA, RAFAEL A.; EMANUELLI, ISABELE P.; BARROS, CIRO M.; NOGUEIRA, MARCELO F. G. Screening of biotechnical parameters for production of bovine inter-subspecies embryonic chimeras by the aggregation of tetraploid Bos indicus and diploid crossbred Bos taurus embryos. REPRODUCTIVE BIOLOGY, v. 16, n. 1, p. 34-40, MAR 2016. Citações Web of Science: 3.

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MÉTODO PARA DETERMINAÇÃO DA VIABILIDADE E QUALIDADE DE EMBRIÕES BR1020120319535 - Universidade Estadual Paulista (UNESP) . Felipe Delestro Matos; Marcelo Fabio Gouveia Nogueira; José Celso Rocha - 14 de dezembro de 2012

METHOD FOR DETERMINING EMBRYO VIABILITY AND QUALITY PCT/BR2013/000506 - Universidade Estadual Paulista (UNESP) . Felipe Delestro Matos; Marcelo Fabio Gouveia Nogueira; José Celso Rocha - 22 de novembro de 2013