Análise funcional e estrutural de proteínas antioxidantes dependentes de tióis: uma investigação de mecanismos moleculares de catálise e da formação de complexos protéicos contendo dissulfetos mistos

• Processo: 07/50930-3
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Apoio a Jovens Pesquisadores
• Vigência: 01 de outubro de 2007 - 30 de junho de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Pesquisador responsável: Marcos Antonio de Oliveira
• Beneficiário: Marcos Antonio de Oliveira
• Instituição-sede: Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus Experimental do Litoral Paulista. São Vicente , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/21365-1 - Investigação do envolvimento da Thr44 de Tsa1 de Saccharomyces cerevisiae na reatividade sobre hidroperóxidos e interação com Trx, BP.IC; 11/23191-0 - Investigação de estados oligoméricos, reatividade sobre hidroperóxidos e relações REDOX de Ahp1 de Saccharomyces cerevisiae., BP.IC; 10/16827-3 - Caracterização funcional e estrutural da proteína Glurho de Xylella fastidiosa., BP.IC; + mais bolsas vinculadas 10/00172-8 - Investigação de transições estruturais e da reatividade sobre peróxidos de TSA1 (thiol specific antioxidant protein 1) de Saccharomyces cerevisiae, BP.DD; 10/06614-2 - Mutagênese sítio dirigida, expressão e purificação da tiorredoxina peroxidase citosólica II (cTpxII) de Saccharomyces cerevisiae e obtenção de complexos proteicos unidos por dissulfetos mistos, BP.IC; 09/04221-6 - Estudo de Interações Protéicas da Tiorredoxina Peroxidase Nuclear (nTPx) de Saccharomyces cerevisae nos Eventos de Crescimento Celular e Silenciamento Telomérico, BP.MS; 08/11590-5 - Investigação comparativa de interações moleculares das tiorredoxinas peroxidase citosólicas I e III (cTPxI e cTPxIII) de Saccharomyces cerevisiae envolvidas na proteção celular e transdução de sinal em resposta ao H2O2 e choques térmicos, BP.DR; 08/10004-5 - Estudo de relações moleculares de tpxi-trxii de saccharomyces cerevisiae através da obtenção de complexos proteicos estáveis, BP.IC; 08/09107-4 - Clonagem, expressão e purificação da proteína glurho (orf xf 2066) de xylella fastidiosa, BP.IC; 08/08587-2 - Mutagênese sítio dirigida, expressão, purificação e obtenção de complexos protéicos de trxi e ctpxiii de saccharomyces cerevisiae, BP.IC; 08/09132-9 - Clonagem, Expressão e Purificação de Tiorredoxinas Peroxidases em Sistemas Bacterianos., BP.TT; 08/02733-7 - Clonagem, Expressão e Purificação de Tiorredoxinas Peroxidases em Sistemas Bacterianos, BP.TT - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Tiorredoxinas Peroxidase Espectrometria de massas Compostos de sulfidrila Dissulfetos Saccharomyces cerevisiae Xylella fastidiosa Cristalografia de raios X
• Publicação FAPESP: http://media.fapesp.br/bv/uploads/pdfs/Investindo...pesquisadores_79_96_96.pdf

Resumo

Tiorredoxinas peroxidases (Tpxs) são capazes de decompor H2O2, peróxidos orgânicos e peroxinitritos, utilizando cisteínas altamente reativas como redutores. A maioria das TPxs utiliza tiorredoxina (Trx) como redutor. NADPH, por sua vez, reduz Trx em reação catalisada por tiorredoxina redutase (Trr). A transferência de elétrons entre essas proteínas ocorre através de pares de cisteínas presentes nos sítios ativos de cada proteína e substituições de uma dessas por serinas levam à formação de complexos unidos por dissulfetos mistos intermoleculares. Trabalhos recentes apontam o envolvimento de TPxs na sinalização celular, seja por meio do estabelecimento de dissulfetos mistos com MAP quinases, seja pela modulação dos níveis celulares de H2O2. Adicionalmente, sob determinadas condições, as TPxs apresentam forte oligomerização que lhes confere a função de chaperona. Este projeto tem por objetivo a análise funcional de TPxs (e relacionadas) e de seus sistemas redutores em Saccharomyces cerevisiae e Xylella fastidiosa, por meio de estudos bioquímicos e determinação da estrutura 3D por meio de cristalografia de raios X de proteínas e complexos. Adicionalmente, serão determinados por espectrometria de massas, novos parceiros proteicos envolvidos na sinalização por H2O2capazes de formar dissulfetos mistos com as TPxs. A caracterização estrutural e funcional dessas proteínas deve resultar em um melhor entendimento de seus mecanismos moleculares de ação e auxiliar na criação de quimioterápicos para o combate a patógenos como, no caso, de X. fastidiosa. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

GUILHEN LONGO, LARISSA VALLE; BREYER, CARLOS ALEXANDRE; NOVAES, GABRIELA MACHADO; GEGEMBAUER, GREGORY; LEITAO JR, NATANAEL PINHEIRO; OCTAVIANO, CARLA ELIZABETE; TOYAMA, MARCOS HIKARI; DE OLIVEIRA, MARCOS ANTONIO; PUCCIA, ROSANA. The Human PathogenParacoccidioides brasiliensisHas a Unique 1-Cys Peroxiredoxin That Localizes Both Intracellularly and at the Cell Surface. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 10, AUG 4 2020. Citações Web of Science: 0.

DE PAULA, CARLA PERES; DOS SANTOS, MELINA CARDOSO; TAIRUM, CARLOS A.; BREYER, CARLOS ALEXANDRE; TOLEDO-SILVA, GUILHERME; TOYAMA, MARCOS HIKARI; MORI, GUSTAVO MARUYAMA; DE OLIVEIRA, MARCOS ANTONIO. Glutaredoxin-like protein (GLP)-a novel bacteria sulfurtransferase that protects cells against cyanide and oxidative stresses. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 104, n. 12 APR 2020. Citações Web of Science: 0.

TAIRUM, CARLOS A.; SANTOS, MELINA CARDOSO; BREYER, CARLOS A.; RYAN GEYER, R.; NIEVES, CECILIA J.; PORTILLO-LEDESMA, STEPHANIE; FERRER-SUETA, GERARDO; TOLEDO, JR., JOSE CARLOS; TOYAMA, MARCOS H.; AUGUSTO, OHARA; NETTO, LUIS E. S.; DE OLIVEIRA, MARCOS A. Catalytic Thr or Ser Residue Modulates Structural Switches in 2-Cys Peroxiredoxin by Distinct Mechanisms. SCIENTIFIC REPORTS, v. 6, SEP 15 2016. Citações Web of Science: 11.

TAIRUM, CARLOS A.; DE OLIVEIRA, MARCOS A.; HORTA, BRUNO B.; ZARA, FERNANDO J.; NETTO, LUIS E. S. Disulfide Biochemistry in 2-Cys Peroxiredoxin: Requirement of Glu50 and Arg146 for the Reduction of Yeast Tsa1 by Thioredoxin. Journal of Molecular Biology, v. 424, n. 1-2, p. 28-41, NOV 23 2012. Citações Web of Science: 23.

OLIVEIRA, MARCOS A.; DISCOLA, KAREN F.; ALVES, SIMONE V.; MEDRANO, FRANCISCO J.; GUIMARAES, BEATRIZ G.; NETTO, LUIS E. S. Insights into the Specificity of Thioredoxin Reductase-Thioredoxin Interactions. A Structural and Functional Investigation of the Yeast Thioredoxin System. BIOCHEMISTRY, v. 49, n. 15, p. 3317-3326, 2010. Citações Web of Science: 35.