Análise funcional e estrutural de proteínas antioxidantes dependentes de tióis: uma investigação de mecanismos moleculares de catálise e da formação de complexos protéicos contendo dissulfetos mistos

• Processo: 07/50930-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Jovens Pesquisadores
• Vigência: 01 de outubro de 2007 - 30 de junho de 2012
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Bioquímica de Microorganismos
• Valor Concedido/Desembolsado (R$): 316.505,02 / 316.505,02
• Vlr. incl. vinculados (R$): 718.591,89 / 718.591,89
• Pesquisador responsável: Marcos Antonio de Oliveira
• Beneficiário: Marcos Antonio de Oliveira
• Instituição Sede: Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus Experimental do Litoral Paulista. São Vicente , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 11/21365-1 - Investigação do envolvimento da Thr44 de Tsa1 de Saccharomyces cerevisiae na reatividade sobre hidroperóxidos e interação com Trx, BP.IC; 11/23191-0 - Investigação de estados oligoméricos, reatividade sobre hidroperóxidos e relações REDOX de Ahp1 de Saccharomyces cerevisiae., BP.IC; 10/16827-3 - Caracterização funcional e estrutural da proteína Glurho de Xylella fastidiosa., BP.IC; + mais bolsas vinculadas 10/00172-8 - Investigação de transições estruturais e da reatividade sobre peróxidos de TSA1 (thiol specific antioxidant protein 1) de Saccharomyces cerevisiae, BP.DD; 10/06614-2 - Mutagênese sítio dirigida, expressão e purificação da tiorredoxina peroxidase citosólica II (cTpxII) de Saccharomyces cerevisiae e obtenção de complexos proteicos unidos por dissulfetos mistos, BP.IC; 09/04221-6 - Estudo de Interações Protéicas da Tiorredoxina Peroxidase Nuclear (nTPx) de Saccharomyces cerevisae nos Eventos de Crescimento Celular e Silenciamento Telomérico, BP.MS; 08/11590-5 - Investigação comparativa de interações moleculares das tiorredoxinas peroxidase citosólicas I e III (cTPxI e cTPxIII) de Saccharomyces cerevisiae envolvidas na proteção celular e transdução de sinal em resposta ao H2O2 e choques térmicos, BP.DR; 08/10004-5 - Estudo de relações moleculares de tpxi-trxii de saccharomyces cerevisiae através da obtenção de complexos proteicos estáveis, BP.IC; 08/09107-4 - Clonagem, expressão e purificação da proteína glurho (orf xf 2066) de xylella fastidiosa, BP.IC; 08/08587-2 - Mutagênese sítio dirigida, expressão, purificação e obtenção de complexos protéicos de trxi e ctpxiii de saccharomyces cerevisiae, BP.IC; 08/09132-9 - Clonagem, Expressão e Purificação de Tiorredoxinas Peroxidases em Sistemas Bacterianos., BP.TT; 08/02733-7 - Clonagem, Expressão e Purificação de Tiorredoxinas Peroxidases em Sistemas Bacterianos, BP.TT - menos bolsas vinculadas
• Assunto(s): Tiorredoxinas Peroxidase Espectrometria de massas Compostos de sulfidrila Dissulfetos Saccharomyces cerevisiae Xylella fastidiosa Cristalografia de raios X
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Analises Funcionais | Complexos Proteicos | Especies Reativas De Oxigenio | Espectrometria De Massas | Tiorredoxinas Peroxidases
• Publicação FAPESP: https://media.fapesp.br/bv/uploads/pdfs/Investindo...pesquisadores_79_96_96.pdf

Resumo

Tiorredoxinas peroxidases (Tpxs) são capazes de decompor H2O2, peróxidos orgânicos e peroxinitritos, utilizando cisteínas altamente reativas como redutores. A maioria das TPxs utiliza tiorredoxina (Trx) como redutor. NADPH, por sua vez, reduz Trx em reação catalisada por tiorredoxina redutase (Trr). A transferência de elétrons entre essas proteínas ocorre através de pares de cisteínas presentes nos sítios ativos de cada proteína e substituições de uma dessas por serinas levam à formação de complexos unidos por dissulfetos mistos intermoleculares. Trabalhos recentes apontam o envolvimento de TPxs na sinalização celular, seja por meio do estabelecimento de dissulfetos mistos com MAP quinases, seja pela modulação dos níveis celulares de H2O2. Adicionalmente, sob determinadas condições, as TPxs apresentam forte oligomerização que lhes confere a função de chaperona. Este projeto tem por objetivo a análise funcional de TPxs (e relacionadas) e de seus sistemas redutores em Saccharomyces cerevisiae e Xylella fastidiosa, por meio de estudos bioquímicos e determinação da estrutura 3D por meio de cristalografia de raios X de proteínas e complexos. Adicionalmente, serão determinados por espectrometria de massas, novos parceiros proteicos envolvidos na sinalização por H2O2capazes de formar dissulfetos mistos com as TPxs. A caracterização estrutural e funcional dessas proteínas deve resultar em um melhor entendimento de seus mecanismos moleculares de ação e auxiliar na criação de quimioterápicos para o combate a patógenos como, no caso, de X. fastidiosa. (AU)

Publicações científicas

(6)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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TAIRUM, CARLOS A.; SANTOS, MELINA CARDOSO; BREYER, CARLOS ALEXANDRE; PIRES DE OLIVEIRA, ANA LAURA; MONTANHERO CABRERA, VITORIA ISABELA; TOLEDO-SILVA, GUILHERME; MORI, GUSTAVO MARUYAMA; TOYAMA, MARCOS HIKARI; SOARES NETTO, LUIS EDUARDO; DE OLIVEIRA, MARCOS ANTONIO. Effects of Serine or Threonine in the Active Site of Typical 2-Cys Prx on Hyperoxidation Susceptibility and on Chaperone Activity. ANTIOXIDANTS, v. 10, n. 7, JUL 2021. (20/02868-1, 07/50930-3, 11/13500-6, 17/20291-0, 17/19942-7, 17/06263-4, 19/04054-4, 13/07937-8, 18/12628-8)

DE PAULA, CARLA PERES; DOS SANTOS, MELINA CARDOSO; TAIRUM, CARLOS A.; BREYER, CARLOS ALEXANDRE; TOLEDO-SILVA, GUILHERME; TOYAMA, MARCOS HIKARI; MORI, GUSTAVO MARUYAMA; DE OLIVEIRA, MARCOS ANTONIO. Glutaredoxin-like protein (GLP)-a novel bacteria sulfurtransferase that protects cells against cyanide and oxidative stresses. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 104, n. 12, APR 2020. (13/16192-6, 13/07937-8, 17/19942-7, 17/06263-4, 11/13500-6, 07/50930-3, 17/20291-0, 10/00172-8, 10/16827-3)

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TAIRUM, CARLOS A.; SANTOS, MELINA CARDOSO; BREYER, CARLOS A.; RYAN GEYER, R.; NIEVES, CECILIA J.; PORTILLO-LEDESMA, STEPHANIE; FERRER-SUETA, GERARDO; TOLEDO, JR., JOSE CARLOS; TOYAMA, MARCOS H.; AUGUSTO, OHARA; et al. Catalytic Thr or Ser Residue Modulates Structural Switches in 2-Cys Peroxiredoxin by Distinct Mechanisms. SCIENTIFIC REPORTS, v. 6, SEP 15 2016. (07/50930-3, 13/07937-8)