Avaliação do papel dos miRNAs 221, 222 e 4728-3p em células-tronco tumorais derivadas de linhagens celulares de câncer de mama Her2+

• Processo: 11/19784-6
• Linha de fomento: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de março de 2012 - 28 de fevereiro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Emmanuel Dias-Neto
• Beneficiário: Emmanuel Dias-Neto
• Instituição-sede: A C Camargo Cancer Center. Fundação Antonio Prudente (FAP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesq. associados: Diana Noronha Nunes
• Assunto(s): Células-tronco Células-tronco neoplásicas Neoplasias mamárias Expressão gênica Análise de sequência de DNA MicroRNAs

Resumo

Vários estudos tem demonstrado que uma pequena população de células em tumores de mama, chamadas células iniciadoras de tumores ou células-tronco tumorais (CSCs), são altamente tumorigênicas quando injetadas em camundongos imunodeficientes. As CSCs, caracterizadas pela expressão de CD44 concomitante à expressão baixa ou indetectável de CD24 (CD44+CD24/low), contribuem para a agressividade tumoral, o desenvolvimento de metástases e a resistência à radio e quimioterapia. Tumores de mama Her2+ são ricos em CSCs, o que parece ser uma das bases de sua maior agressividade quando comparados a tumores sem a amplificação deste oncogene. Alguns miRNAs foram descritos por serem diferencialmente expressos em células-tronco tumorais, sugerindo seu papel específico na regulação de processos biológicos destas células. A expressão aumentada dos miRNAs 221 e 222 em CSCs de mama, assim como a elevação dos níveis de miR-4728-3p (mapeado em um intron de Her2) em linhagens tumorais Her2+ já foram documentados. Este projeto busca um melhor entendimento da biologia das CSCs em linhagens celulares de mama Her2+ e do envolvimento da expressão aberrante de miR-221, -222 e -4728-3p nestas células. Para isto, linhagens serão cultivadas em condições que favorecem a formação de esferas - estruturas celulares esferóides ricas em CSCs, que não se diferenciam, não entram em apoptose e possuem características de células-tronco, incluindo a expressão de OCT-4, NANOG e SOX2. A eficiência de formação de esferas (MFE), a capacidade de auto-renovação e manutenção de células-tronco de linhagens Her2+ serão avaliadas, assim como a MFE na presença da super-expressão ou inibição de miR-221, 222 e 4728-3p. O potencial de migração e invasão das células nas condições descritas será avaliado e os genes-alvo regulados por estes miRNAs serão investigados experimentalmente. (AU)