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Modelo experimental de conjuntivite alérgica: efeito do tratamento farmacológico com a proteína anti-inflamatória galectina-1

Processo: 11/21845-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de março de 2012 - 28 de fevereiro de 2014
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Histologia
Pesquisador responsável:Cristiane Damas Gil
Beneficiário:Cristiane Damas Gil
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Pesq. associados:Sonia Maria Oliani
Assunto(s):Conjuntivite alérgica  Mastócitos  Galectinas 

Resumo

A conjuntivite alérgica (CA) representa uma doença complexa do sistema imune envolvendo a desgranulação dos mastócitos na conjuntiva e a liberação de mediadores inflamatórios e citocinas que provocam a infiltração de células inflamatórias nesse tecido. Essa inflamação é o principal fator contribuinte para inúmeras desordens oculares, podendo levar à diminuição da acuidade visual, e até mesmo à cegueira. Nos tratamentos das inflamações intra-oculares, em geral, são os glicocorticóides os medicamentos frequentemente administrados cujos efeitos colaterais estimulam buscas por novas estratégias terapêuticas. Entre os mediadores anti-inflamatórios, incluímos a proteína endógena galectina-1 (Gal-1) capaz de controlar o processo de transmigração dos leucócitos, liberação de citocinas e desgranulação de mastócitos, contribuindo para a homeostase da reação inflamatória. Contudo, a expressão da Gal-1 em tecidos oculares normais e inflamados tem sido pouco estudada. Desse modo, analisaremos em um modelo experimental de CA, a expressão e o mecanismo de ação da proteína endógena Gal-1 nos tecidos oculares de camundongos. Os animais serão imunizados (dias 0 e 7) i.p. com ovalbumina (OVA; 1 µg) e nos dias 15 e 18, receberão instilação direta no saco conjuntival de 250 µg de OVA em 10 µl de PBS. Outro grupo de animais sensibilizados serão pré-tratados i.p. nos dias 15-18 com a proteína Gal-1 recombinante (rGal-1; 0,3 µg por animal) ou dexametasona (0,5 mg/kg), diluídos em 0,1 mL de PBS. Os animais controles receberão apenas PBS. Após 4 e 24 horas do último desafio com OVA, os animais serão anestesiados, submetidos à punção cardíaca para obtenção de sangue e coleta do fluido lacrimal e, posteriormente sacrificados por deslocamento cervical para enucleação dos olhos e dissecção do baço e linfonodos. Os estudos serão realizados por meio de: análises histopatológicas e quantitativas de mastócitos e leucócitos nos tecidos oculares e sangue; imunocitoquímica ultra-estrutural para detectar a co-localização da proteína Gal-1 e das moléculas de adesão L-selectina e ²2-integrina nas células inflamatórias nos tecidos oculares; Western blotting para detectar a expressão endógena da Gal-1 e das quinases envolvidas na via MAPK nos tecidos oculares, baço e linfonodos e; dosagens das citocinas IL-2, IL-4, IL-5, IL-10 e IFN-³ no sangue, fluido lacrimal e homogeneizados dos tecidos oculares, baço e linfonodos. Os resultados dos estudos poderão indicar o mecanismo de ação da Gal-1 nos processos inflamatórios oculares alérgicos e proporcionar novas alternativas terapêuticas. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ZANON, CAROLINE DE FREITAS; SONEHARA, NATHALIA MARTINS; GIROL, ANA PAULA; GIL, CRISTIANE DAMAS; OLIANI, SONIA MARIA. Protective effects of the galectin-1 protein on in vivo and in vitro models of ocular inflammation. MOLECULAR VISION, v. 21, p. 1036-1050, . (11/05248-5, 12/02759-1, 11/21845-3)
MELLO, CLAUDIA BOSNIC; RAMOS, LISANDRA; GIMENES, ALEXANDRE DANTAS; DE MORAES ANDRADE, TERESA RAQUEL; OLIANI, SONIA MARIA; GIL, CRISTIANE DAMAS. Immunomodulatory Effects of Galectin-1 on an IgE-Mediated Allergic Conjunctivitis Model. INVESTIGATIVE OPHTHALMOLOGY & VISUAL SCIENCE, v. 56, n. 2, p. 693-704, . (11/21845-3)

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