Óleo essencial de Hymenaea courbaril: formulação, efeito sobre fibroblastos e células epiteliais de pterígio in vitro e ensaios in vivo de toxicidade local e sistêmica

• Processo: 11/00990-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de junho de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2014
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Cirurgia
• Pesquisador responsável: Silvana Artioli Schellini
• Beneficiário: Silvana Artioli Schellini
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina (FMB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Botucatu
• Pesquisadores associados: Anselmo Gomes de Oliveira ; Carla Adriene da Silva Franchi ; Carlos Roberto Padovani ; Claudia Aparecida Rainho ; Claudia Helena Pellizzon ; Jose Galberto Martins da Costa ; Márcia Guimarães da Silva
• Assunto(s): Procedimentos cirúrgicos oftalmológicos Pterígio Hymenaea Nanopartículas Fibroblastos Células epiteliais Toxicidade Óleos essenciais
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Hymenae courbaril | óleo essencial | Pterígio | Recidiva | Tratamento | Oftalmologia

Resumo

O pterígio é uma lesão conjuntival que afeta muitos brasileiros, possui patogênese multifatorial e não possui, até o momento, nenhum tratamento que possa ser considerado ideal. No Nordeste há uma crença popular do uso de uma infusão a base de Hymenaea courbaril em olhos de portadores de pterígio com relatos de efeitos benéficos. Tendo em vista que este fitoterápico possui efeito anti-inflamatório e a inflamação é cogitada entre os possíveis agentes patogênicos do pterígio, nos propusemos a desenvolver este projeto com os seguintes objetivos: investigar a toxicidade pré-clínica da Hymenaea courbaril, avaliando desde a composição química até efeitos sobre as células da superfície ocular e toxicidade local e sistêmica. Para isso devem se desenvolvidos seis estudos: Experimento 1: Obtenção e caracterização química do óleo essencial de Hymenaea courbaril - o óleo obtido da planta deverá ser avaliado quanto às suas características químicas por cromatografia em fase gasosa, acoplada a espectrometria de massa. A extração do óleo essencial será realizada por destilação por arraste a vapor, a partir da resina da planta. Experimento 2: Transformação do óleo essencial de Hymenaea courbaril em fitoterápico usando tecnologia de sistemas dispersos líquidos nanoparticulados, contendo óleo essencial de Hymenaea courbaril, com alta capacidade de permeação. Serão desenvolvidos e caracterizados em sistemas biocompatíveis, apropriados para administração ocular, usando tecnologia de obtenção de ultrasonicação ou homogeneização de alta pressão. Experimento 3: Estudo da relação dose-efeito do óleo essencial de Hymenaea courbaril - avaliação do efeito de diferentes concentrações do óleo essencial Hymenaea courbaril sobre a proliferação em cultura de células de fibroblastos e células epiteliais de material de exérese de pterígio. O objetivo principal deste experimento é estabelecer a curva de efeito de dose/resposta. Experimento 4: Avaliação do efeito do óleo essencial e do fitoterápico nanoemulsionado sobre cultura de células de fibroblastos da cápsula de Tenon e de células epiteliais da conjuntiva de portadores de pterígios e da conjuntiva normal - avaliação de 20 fragmentos de pterígios e de conjuntiva normal, comparando em cultura de células o efeito do fitoterápico sobre a proliferação dos fibroblastos da cápsula de Tenon e células do epitélio conjuntival dos pterígios e do tecido normal, antes e após exposição a óleos essenciais da Hymenaea courbaril, colocados para agir durante 3 minutos. Deve ainda ser estudado o sobrenadante das culturas, no intuito de verificar a presença de citocinas inflamatórias. Experimento 5: Estudo de toxicidade sistêmica do óleo essencial de Hymenaea courbaril - 60 ratos adultos, divididos em quatro grupos de 10 animais que receberão óleo essencial de Hymenaea courbaril via oral, em dose única diária, 7 dias por semana/28 dias. Para o grupo controle será administrado óleo vegetal de soja de maneira semelhante aos grupos testados. Serão observadas a ocorrência de secreção, sinais autonômicos, reação e tamanho pupilar. Aos 28 dias será avaliada a reatividade sensorial a estímulos auditivo, visual e proprioceptivo, e observação de atividade motora. Também será realizado estudo de peso e ingestão de água e alimento em gaiola metabólica 1X/semana e exame hematológico e bioquímico aos 28 dias de experimento. Serão analisados parâmetros anátomo-patológicos de órgãos vitais após a morte. Experimento 6: Estudo de toxicidade local (ocular) do óleo essencial de Hymenaea courbaril- serão seguidos os guidelines OECD para testes químicos, a fim de avaliar a irritação ocular aguda em 5 coelhos, na concentração do IC 50, com doses de 0,1mL 4X/ dia /7 dias, no olho direito dos animais e o olho esquerdo será o controle, examinados diariamente por 21 dias. Todos os resultados a serem obtidos serão transferidos para Planilha Excel e deverão receber tratamento estatístico. (AU)