Implantação e otimização de métodos para autenticação de linhagens celulares

• Processo: 12/04164-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de julho de 2012 - 30 de junho de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Biologia Geral
• Pesquisador responsável: Maria Judite Bittencourt Fernandes
• Beneficiário: Maria Judite Bittencourt Fernandes
• Instituição Sede: Instituto Biológico (IB). Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios (APTA). Secretaria de Agricultura e Abastecimento (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Isabela Cristina Simoni
• Bolsa(s) vinculada(s): 14/01127-7 - Identificação de espécies das linhagens celulares por analise molecular, BP.TT; 12/16583-2 - Identificação de espécies das linhagens celulares por perfil isoenzimático e molecular., BP.TT
• Assunto(s): Cultura de células Linhagem celular Cariotipagem Isoenzimas Reação em cadeia por polimerase (PCR) Repetições de microssatélites Eletroforese
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: autenticação | Contaminação Cruzada | isoenzimas | linhagens celulares | Pcr | Culturas celulares

Resumo

As linhagens celulares de mamíferos são utilizadas nas mais diversas áreas da pesquisa científica tornando fundamental a obtenção das mesmas de uma fonte confiável e segura; também é importante a autenticação dessas linhagens, isto é, uma certificação de identidade da espécie de origem e uma isenção de contaminação cruzada. Tanto a identificação errônea como a contaminação das linhagens pode comprometer os resultados oriundos da utilização delas e dessa forma um monitoramento contínuo para controle de qualidade das linhagens celulares deve ser feito regularmente pelos laboratórios de pesquisa e de produção para geração de dados confiáveis. Vários métodos são utilizados para verificação da espécie das linhagens celulares como cariotipagem e análises imunológica, isoenzimática e molecular. A análise eletroforética das isoenzimas é o método padrão utilizado pelos principais centros certificadores internacionais inclusive útil também para detecção de contaminação cruzada inter-espécies. Técnicas moleculares direcionadas para o DNA mitocondrial também podem ser utilizadas para esta identificação de espécies tanto de linhagens celulares animais como humanas; já as técnicas baseadas nas regiões micro-satélites do DNA foram desenvolvidas apenas para as linhagens humanas (contaminação intra-espécies). O objetivo do projeto é a implantação de uma técnica molecular para verificação de espécie das linhagens celulares animais além da otimização da técnica de eletroforese de isoenzimas. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SHIRLEY B. DE ARAÚJO; GIANCARLO F. PATRICIO; ISABELA C. SIMONI; ELIANA B. RIVAS; MARIA JUDITE B. FERNANDES. Isoenzyme and molecular approach for authenticating and monitoring of animal cell lines. Anais da Academia Brasileira de Ciências, v. 91, n. 3, 2019-10-14. (12/04164-5)