Busca avançada
Ano de início
Entree

Estudo das interações entre a proteína telomérica RPA-1 de Leishmania amazonensis (LaRPA-1) e suas parceiras na presença e ausência de estresse oxidativo

Processo: 12/50263-5
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de agosto de 2012 - 31 de março de 2015
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Genética - Genética Molecular e de Microorganismos
Pesquisador responsável:Maria Isabel Nogueira Cano
Beneficiário:Maria Isabel Nogueira Cano
Instituição-sede: Instituto de Biociências (IBB). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
Assunto(s):Telômero  Proteínas de ligação a telômeros  Telomerase  Leishmania mexicana  Estresse oxidativo  Dano ao DNA 

Resumo

Tetômeros são complexos DNA/proteína que protegem as pontas dos cromossomos. A manutenção dos telômeros e a atividade da telomerase dependem de complexos protéicos que se associam com o DNA telomérico. Por exemplo, o complexo CST (CDC13/Stn1/Ten1) interage com a telomerase e com a maquinária de replicação do DNA, controlando a replicação nos terminais de cromossomos. Telômeros de tripanossomatídeos são compostos por repetições (TTAGGG)n, porém poucas proteínas teloméricas específicas a estes organismos foram identificadas. O complexo telomérico melhor caracterizado é o de L. amazonensis, que consiste basicamente das proteínas telomerase, LaRBP38 e LaRPA-1 que interagem com a simples fita rica em G e podem ser homólogas funcionais da CDC13 de levedura e da POT1 de vertebrados. A RPA-1 é um complexo proteico ligante de DNA na forma de simples-fita que desempenha papel importante no metabolismo de DNA, incluindo manutenção de telômeros e reparo de DNA. A hipótese que iremos testar, e que norteia este pedido, baseia-se no fato da LaRPA-1 e proteínas ainda não identificadas, estarem envolvidas na formação do complexo de proteção (capping) e manutenção de telômeros em L. amazonensis. Pretendemos primeiramente confirmar interações in vitro já conhecidas entre LaRPA-1 e outras proteínas previamente caracterizadas em nosso laboratório, isolar novos interatores usando métodos bioquímicos e estudar estas interações in vivo utilizando o sistema de duplo-híbrido. Os testes in vitro serão realizados com extratos de parasitas obtidos em condições normais de cultura e também de parasitas submetidos a estresse oxidativo. Aqui vale lembrar que a exposição de L. amazonensis a concentrações elevadas de oxigênio provocam danos metabólicos irreversíveis que afetam o crescimento, a morfologia e a capacidade de transformação dos parasitas. Como os telômeros são estruturas genômicas muito sensíveis aos danos oxidativos, estudar sua constituição em condições de estresse pode nos auxiliar a isolar novos componentes proteicos que cumpram papel importante na sua proteção ("capping"). (AU)

Publicações científicas (4)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
DA SILVA, MARCELO SANTOS; SEGATTO, MARCELA; PAVANI, RAPHAEL SOUZA; GUTIERREZ-RODRIGUES, FERNANDA; BISPO, VANDERSON DA SILVA; GENNARI DE MEDEIROS, MARISA HELENA; CALADO, RODRIGO TOCANTINS; ELIAS, MARIA CAROLINA; NOGUEIRA CANO, MARIA ISABEL. Consequences of acute oxidative stress in Leishmania amazonensis: From telomere shortening to the selection of the fittest parasites. BIOCHIMICA ET BIOPHYSICA ACTA-MOLECULAR CELL RESEARCH, v. 1864, n. 1, p. 138-150, JAN 2017. Citações Web of Science: 7.
PAVANI, R. S.; FERNANDES, C.; PEREZ, A. M.; VASCONCELOS, E. J. R.; SIQUEIRA-NETO, J. L.; FONTES, M. R.; CANO, M. I. N. RPA-1 from Leishmania amazonensis (LaRPA-1) structurally differs from other eukaryote RPA-1 and interacts with telomeric DNA via its N-terminal OB-fold domain. FEBS Letters, v. 588, n. 24, p. 4740-4748, DEC 20 2014. Citações Web of Science: 6.
VASCONCELOS, ELTON J. R.; NUNES, VINICIUS S.; DA SILVA, MARCELO S.; SEGATTO, MARCELA; MYLER, PETER J.; CANO, MARIA ISABEL N. The Putative Leishmania Telomerase RNA (LeishTER) Undergoes Trans-Splicing and Contains a Conserved Template Sequence. PLoS One, v. 9, n. 11 NOV 12 2014. Citações Web of Science: 4.
DA SILVA, MARCELO SANTOS; MONTEIRO, JOMAR PATRICIO; NUNES, VINICIUS SANTANA; VASCONCELOS, ELTON JOSE; PEREZ, ARINA MARINA; FREITAS-JUNIOR, LUCIO DE HOLANDA; ELIAS, MARIA CAROLINA; NOGUEIRA CANO, MARIA ISABEL. Leishmania amazonensis Promastigotes Present Two Distinct Modes of Nucleus and Kinetoplast Segregation during Cell Cycle. PLoS One, v. 8, n. 11 NOV 21 2013. Citações Web of Science: 15.

Por favor, reporte erros na lista de publicações científicas escrevendo para: cdi@fapesp.br.