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Clonagem e expressão de toxinas animais de interesse biotecnológico

Processo: 12/14996-8
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de outubro de 2012 - 30 de setembro de 2014
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Farmácia - Análise Toxicológica
Pesquisador responsável:Eliane Candiani Arantes Braga
Beneficiário:Eliane Candiani Arantes Braga
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Pesq. associados:Flavio Henrique da Silva ; Ludier Kesser Santos Silva ; Renata Santos Rodrigues ; Simone Kashima Haddad
Assunto(s):Toxicologia  Serina proteases 

Resumo

Atualmente, o interesse pelo estudo das características químicas e funcionais de toxinas isoladas de peçonhas animais não é devido somente à sua relevância no envenenamento, mas também pela sua potencial utilização como valiosos instrumentos de pesquisa. As hialuronidases de peçonha de escorpiões e serpentes são enzimas que catalisam a quebra do hialuronan, um dos principais componentes da matriz extracelular, e atuam como "fator de espalhamento", por acelerarem a absorção e difusão da peçonha pelos tecidos da vítima, contribuindo para o envenenamento local ou sistêmico. Embora as hialuronidases sejam extensivamente usadas em diversas áreas da medicina, o número de estudos publicados com esta enzima é reduzido, devido às dificuldades de purificação da enzima a partir das peçonhas. Já as serinoproteases de peçonha de serpentes são consideradas promissoras no desenvolvimento de fármacos para o tratamento de determinadas desordens hemostáticas por agirem em pontos específicos da cascata de coagulação, mimetizando a ação de componentes regulatórios naturais, além de atuarem principalmente sobre proteínas plasmáticas, agregação plaquetária, pressão sanguínea, sistema complemento e sistema nervoso. Apesar da diversidade de ações fisiopatológicas e do potencial farmacológico apresentado pelas toxinas animais, há uma discrepância entre o enorme número de proteínas isoladas e caracterizadas e a quantidade de proteínas que vêm a se tornar efetivamente um medicamento, o que se deve às limitações na obtenção de toxinas em quantidades suficientes para uma caracterização estrutural e funcional detalhada e a impossibilidade de manipulação da molécula nativa. Desta forma, a expressão heteróloga de proteínas, consiste em uma alternativa para a obtenção de toxinas em escala laboratorial para o estudo de suas atividades enzimáticas e funcionais. Portanto, o presente projeto visa à clonagem e expressão da hialuronidase de T. serrulatus e serinoproteases de B. pauloensis e C. d. collilineatus em sistema heterólogo, o qual consiste em uma alternativa viável para a obtenção das mesmas em quantidades suficientes para o estudo de suas atividades enzimáticas e biológicas. Além disso, o estudo comparativo das toxinas na forma nativa e recombinante pode gerar perspectivas para a produção destas toxinas em escala industrial, visando sua aplicação terapêutica e farmacológica. (AU)

Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
AMORIM, FERNANDA GOBBI; LONGHIM, HELOISA TAVONI; COLOGNA, CAMILA TAKENO; DEGUELDRE, MICHEL; DE PAUW, EDWIN; QUINTON, LOIC; ARANTES, ELIANE CANDIANI. Proteome of fraction from Tityus serrulatus venom reveals new enzymes and toxins. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 25, APR 18 2019. Citações Web of Science: 0.
DE OLIVEIRA, ISADORA SOUSA; PUCCA, MANUELA BERTO; SAMPAIO, SUELY VILELA; ARANTES, ELIANE CANDIANI. Antivenomic approach of different Crotalus durissus collilineatus venoms. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 24, NOV 26 2018. Citações Web of Science: 0.
DE OLIVEIRA, ISADORA SOUSA; MANZINI, RAFAELLA VARZONI; FERREIRA, ISABELA GOBBO; CARDOSO, IARA AIME; FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO; THOMAZELA MACHADO, ANA RITA; GREGGI ANTUNES, LUSANIA MARIA; ROSA, JOSE CESAR; ARANTES, ELIANE CANDIANI. Cell migration inhibition activity of a non-RGD disintegrin from Crotalus durissus collilineatus venom. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases, v. 24, OCT 20 2018. Citações Web of Science: 0.
AMORIM, FERNANDA GOBBI; CORDEIRO, FRANCIELLE ALMEIDA; PINHEIRO-JUNIOR, ERNESTO LOPES; BOLDRINI-FRANCA, JOHARA; ARANTES, ELIANE CANDIANI. Microbial production of toxins from the scorpion venom: properties and applications. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 102, n. 15, p. 6319-6331, AUG 2018. Citações Web of Science: 0.
AMORIM, FERNANDA GOBBI; BOLDRINI-FRANCA, JOHARA; FIGUEIREDO BORDON, KARLA DE CASTRO; CARDOSO, IARA AIME; DE PAUW, EDWIN; QUINTON, LOUC; KASHIMA, SIMONE; ARANTES, ELIANE CANDIANI. Heterologous expression of rTsHyal-1: the first recombinant hyaluronidase of scorpion venom produced in Pichia pastoris system. Applied Microbiology and Biotechnology, v. 102, n. 7, p. 3145-3158, APR 2018. Citações Web of Science: 4.

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