Avaliação da expressão gênica e protéica em processos inflamatórios e neoplasias do trato digestório: estômago e colorretal

• Processo: 12/15036-8
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de novembro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de outubro de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Genética - Genética Humana e Médica
• Pesquisador responsável: Ana Elizabete Silva
• Beneficiário: Ana Elizabete Silva
• Instituição Sede: Instituto de Biociências, Letras e Ciências Exatas (IBILCE). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de São José do Rio Preto. São José do Rio Preto , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 14/05217-0 - Avaliação da expressão gênica e protéica em processos inflamatórios e neoplasias do trato digestório: estômago e colorretal, BP.TT; 13/00796-0 - Avaliação da expressão gênica e protéica em processos inflamatórios e neoplasias do trato digestório: estômago e colorretal., BP.TT
• Assunto(s): Neoplasias colorretais Neoplasias do sistema digestório Lesões pré-cancerosas Helicobacter pylori Expressão gênica RNA mensageiro
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: câncer gástrico | carcinoma colorretal | expressão gênica | Helicobacter pylori | inflamação e câncer | lesões pré-cancerosas | Genética do câncer

Resumo

Estudos recentes têm revelado que inflamações crônicas predispõem para diferentes tipos de cânceres, com o envolvimento de componentes importantes do processo inflamatório na carcinogênese. No trato digestório, ambos órgãos estômago e cólon estão expostos a diversos fatores endógenos e exógenos associados ao estilo de vida que podem desencadear o processo inflamatório, como a infecção pela bactéria H. pylori que aumenta o risco para o câncer gástrico. A erradicação da H. pylori é considerada um tratamento de primeira linha para reverter às lesões pré-neoplásicas e prevenir a progressão maligna, mas uma parcela dos pacientes não tem resposta efetiva. Poucos estudos têm avaliado a ocorrência de alterações genéticas antes e após a erradicação da bactéria, que possam auxiliar no esclarecimento de mudanças importantes relacionadas à resposta dos pacientes a terapia em associação com os genótipos de virulência da bactéria. O câncer colorretal (CCR) também se enquadra como modelo de carcinogênese relacionada com processo inflamatório, como a colite ulcerativa e a infecção pela bactéria Fusobacterium nucleatum. Frequentemente seu desenvolvimento segue a sequência adenoma-carcinoma, pois, na maioria dos casos, o CCR origina-se como pólipo adenomatoso. Diante do exposto, o presente projeto tem por objetivos avaliar a expressão do RNAm de genes que atuam na resposta inflamatória do hospedeiro como TLR2, TLR4, IL-8, TGF-², PAP, PAI-1, PLAT e IFITM1 em pacientes com dispepsia gástrica antes e após a terapia de erradicação da H. pylori, pela técnica de qPCR em tempo real; investigar a expressão protéica dos respectivos genes, por método imuno-histoquímico; bem como investigar os genótipos de virulência cagA da H. pylori e associação com a resposta a erradicação da bactéria, como também com o padrão de expressão gênica e protéica. Também será avaliada a cinética celular, como o índice de proliferação celular e o índice apoptótico. Recentemente finalizamos uma pesquisa sobre a expressão gênica e protéica da Anexina-1 e Galectina-1, com ação anti-inflamatória em gastrite crônica e câncer gástrico que evidenciaram expressão elevada do RNAm e da proteína anexina-1 em gastrite e no câncer gástrico, mas a galectina-1 apresentou expressão elevada apenas no câncer gástrico. Portanto sendo interessante também investigar em outras lesões precursoras que fazem parte da cascata de progressão do câncer de estômago. Portanto, pretendemos avaliar a expressão quantitativa do RNAm dos genes ANXA1 (anexina-1) e LGALS1 (galectina-1) e expressão protéica em amostras de metaplasia intestinal, úlcera gástrica e mucosa gástrica normal, pela técnica de qPCR em tempo real e imuno-histoquímica, respectivamente, assim como associar com a infecção pela H. pylori e os genótipos de virulência cagA e vacA. Da mesma forma em carcinoma colorretal e sua lesão precursora adenoma, também serão analisados os níveis de expressão gênica e protéica da anexina-1 e galectina-1 e índice de proliferação pelo antígeno Ki-67 e associação com a abundância da bactéria Fusobacterium nucleatum. Ainda em CCR pretendemos avaliar os níveis de expressão gênica dos receptores de patógenos TLR2 e TLR4 que apresentam polimorfismos funcionais como TLR2 -196 a -174 del e TLR4 -1607 T/C visando avaliar sua possível influência conforme os portadores dos genótipos selvagens ou polimórficos nos níveis de expressão desses genes e suscetibilidade ao câncer colorretal esporádico. Os resultados poderão evidenciar mudanças na expressão de genes importantes associados com o processo inflamatório, que possam auxiliar na em estratégias futuras de terapias mais efetivas dessas lesões e prevenção da progressão maligna. (AU)

Publicações científicas

(8)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

TARGA CADAMURO, ALINE CRISTINA; TEIXEIRA ROSSI, ANA FLAVIA; BISELLI-PERICO, JOICE MATOS; PEREIRA, PATRICIA FUCUTA; BEDIN MASCARIN DO VALE, EDLA POLSINELLI; ACAYABA, RICARDO; MOREIRA LEITE, KTIA RAMOS; GOLONI-BERTOLLO, ENY MARIA; SILVA, ANA ELIZABETE. Effect of Helicobacter pylori Eradication on TLR2 and TLR4 Expression in Patients with Gastric Lesions. Mediators of Inflammation, 2015. (12/15036-8)

TEIXEIRA ROSSI, ANA FLAVIA; DUARTE, MARCIA CRISTINA; POLTRONIERI, AYLA BLANCO; VALSECHI, MARINA CURADO; JORGE, YVANA CRISTINA; NETO, DALISIO DE-SANTI; RAHAL, PAULA; OLIANI, SONIA MARIA; SILVA, ANA ELIZABETE. Deregulation of Annexin-A1 and Galectin-1 Expression in Precancerous Gastric Lesions: Intestinal Metaplasia and Gastric Ulcer. Mediators of Inflammation, 2014. (12/15036-8)

JORGE, YVANA CRISTINA; MATARUCO, MAYRA MIOTO; ARAUJO, LEANDRO PIRES; TEIXEIRA ROSSI, ANA FLAVIA; DE OLIVEIRA, JULIANA GARCIA; VALSECHI, MARINA CURADO; CAETANO, ALAOR; MIYAZAKI, KENJI; DE JESUS FAZZIO, CELIA SEBASTIANA; THOME, JORGE ALBERTO; et al. Expression of Annexin-A1 and Galectin-1 Anti-Inflammatory Proteins and mRNA in Chronic Gastritis and Gastric Cancer. Mediators of Inflammation, 2013. (12/15036-8)

POLTRONIERI-OLIVEIRA, AYLA BLANCO; MADEIRA, FERNANDA FERNANDEZ; SANTOS MARQUES NUNES, DENIS BRUNO; RODRIGUES, GABRIELA HELENA; LOPES, BEATRIZ CAMARGO; MANOEL-CAETANO, FERNANDA S.; BISELLI, JOICE MATOS; SILVA, ANA ELIZABETE. Polymorphisms of miR-196a2 (rs11614913) and miR-605 (rs2043556) confer susceptibility to gastric cancer. GENE REPORTS, v. 7, p. 154-163, JUN 2017. (12/15036-8)

TEIXEIRA ROSSI, ANA FLAVIA; DUARTE, MARCIA CRISTINA; POLTRONIERI, AYLA BLANCO; VALSECHI, MARINA CURADO; JORGE, YVANA CRISTINA; NETO, DALISIO DE-SANTI; RAHAL, PAULA; OLIANI, SONIA MARIA; SILVA, ANA ELIZABETE. Deregulation of Annexin-A1 and Galectin-1 Expression in Precancerous Gastric Lesions: Intestinal Metaplasia and Gastric Ulcer. Mediators of Inflammation, v. 2014, p. 11-pg., 2014-01-01. (12/15036-8)

TARGA CADAMURO, ALINE CRISTINA; TEIXEIRA ROSSI, ANA FLAVIA; BISELLI-PERICO, JOICE MATOS; PEREIRA, PATRICIA FUCUTA; BEDIN MASCARIN DO VALE, EDLA POLSINELLI; ACAYABA, RICARDO; MOREIRA LEITE, KTIA RAMOS; GOLONI-BERTOLLO, ENY MARIA; SILVA, ANA ELIZABETE. Effect of Helicobacter pylori Eradication on TLR2 and TLR4 Expression in Patients with Gastric Lesions. Mediators of Inflammation, v. 2015, p. 9-pg., 2015-01-01. (12/15036-8)

TEIXEIRA ROSSI, ANA FLAVIA; TARGA CADAMURO, ALINE CRISTINA; BISELLI-PERICO, JOICE MATOS; MOREIRA LEITE, KATIA RAMOS; SEVERINO, FABIO EDUARDO; REIS, PATRICIA P.; CORDEIRO, JOSE ANTONIO; SILVA, ANA ELIZABETE. Interaction between inflammatory mediators and miRNAs in Helicobacter pylori infection. Cellular Microbiology, v. 18, n. 10, p. 1444-1458, OCT 2016. (13/03625-1, 12/15036-8)

PROENCA, MARCELA ALCANTARA; DE OLIVEIRA, JULIANA GARCIA; TARGA CADAMURO, ALINE CRISTINA; SUCCI, MAYSA; NETINHO, JOAO GOMES; GOLONI-BERTOLO, ENY MARIA; PAVARINO, ERIKA CRISTINA; SILVA, ANA ELIZABETE. TLR2 and TLR4 polymorphisms influence mRNA and protein expression in colorectal cancer. WORLD JOURNAL OF GASTROENTEROLOGY, v. 21, n. 25, p. 7730-7741, JUL 7 2015. (12/15036-8)