Cultura heterotípica: efeitos da associação entre células epiteliais, estroma mamário, macrófagos e plaquetas no câncer de mama: liberação de enzimas proteolíticas e sinalização dos receptores toll-like

• Processo: 12/19780-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2012
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2015
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Medicina - Saúde Materno-infantil
• Pesquisador responsável: Manoel João Batista Castello Girão
• Beneficiário: Manoel João Batista Castello Girão
• Instituição Sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Assunto(s): Ginecologia Neoplasias mamárias Células epiteliais Receptores toll-like Plaquetas sanguíneas Enzimas proteolíticas Macrófagos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Câncer de mama | cultura heterotípica | enzimas proteolíticas | Plaquetas | Toll-like receptor | Ginecologia e bioquímica

Resumo

O câncer de mama é uma doença multifatorial heterotípica a qual por muito tempo pesquisadores tentaram extrair da sua complexidade modelos experimentais puristas e mais objetivos, o cultivo de células epiteliais. Este sistema permitiu o avanço da genética e biologia molecular do câncer. Entretanto, o cultivo único de células epiteliais imortalizadas mamárias é insuficiente para mimetizar o microambiente tumoral. Devemos ressaltar que as linhagens imortalizadas de células tumorais, se desenvolveram sem interações heterotípicas, e desviam do comportamento de células de tumores humanos. Há evidências de que em carcinomas de mama, 90% das células presentes na massa tumoral, não são neoplásicas [1]. Neste sentido, a cultura heterotípica formada basicamente por células epiteliais, estroma mamário, macrófagos e plaquetas apresentam uma melhor alternativa para investigação dos sinais bioquímicos associados com enzimas proteolíticas e fatores tróficos, os agonistas dos receptores toll-like. O presente projeto tem como objetivos: 1) a caracterização das células e tecidos extraídos de biópsias de pacientes com e sem câncer de mama, 2) bem como identificar o perfil lisossomal e mitocondrial dessas células. 3) E, posteriormente identificar enzimas proteolíticas que estão sendo secretadas com a interação dessas células através de biblioteca de substratos FRETs, 4) após a identificação das enzimas e substratos, procederemos com a avaliação da ativação das plaquetas por essas enzimas. 5) Finalmente, temos como alvo a ativação de receptores toll-like em células epiteliais e em plaquetas, pelo meio de cultivo da cultura heterotípica entre fibroblastos e adipócitos. Com base nessas informações, esse projeto nos permitirá novas abordagens terapêuticas tendo como alvo as células epiteliais mamárias de diferentes estadios mimetizadas com a estrutura estromal, macrófagos e plaquetas. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

BONAZZA, CAMILA; ANDRADE, SHEILA SIQUEIRA; SUMIKAWA, JOANA TOMOMI; BATISTA, FABRICIO PEREIRA; PAREDES-GAMERO, EDGAR J.; GIRAO, MANOEL J. B. C.; OLIVA, MARIA LUIZA V.; CASTRO, RODRIGO AQUINO. Primary Human Uterine Leiomyoma Cell Culture Quality Control: Some Properties of Myometrial Cells Cultured under Serum Deprivation Conditions in the Presence of Ovarian Steroids. PLoS One, v. 11, n. 7, JUL 8 2016. (12/19851-8, 09/53766-5, 12/19780-3)

OTTAIANO, TATIANA F.; ANDRADE, SHEILA S.; DE OLIVEIRA, CLEIDE; SILVA, MARIANA C. C.; BURI, MARCUS V.; JULIANO, MARIA A.; GIRAO, MANOEL J. B. C.; SAMPAIO, MISAKO U.; SCHMAIER, ALVIN H.; WLODAWER, ALEXANDER; et al. Plasma kallikrein enhances platelet aggregation response by subthreshold doses of ADP. Biochimie, v. 135, p. 72-81, APR 2017. (12/19780-3, 09/53766-5)

ANDRADE, SHEILA SIQUEIRA; SUMIKAWA, JOANA TOMOMI; CASTRO, ELOISA DOGNANI; BATISTA, FABRICIO PEREIRA; PAREDES-GAMERO, EDGAR; OLIVEIRA, LILIAN CAROLINA; GUERRA, IZABEL MONASTERIO; PERES, GIOVANI BRAVIN; CAVALHEIRO, RENAN PELLUZZI; JULIANO, LUIZ; et al. Interface between breast cancer cells and the tumor microenvironment using platelet-rich plasma to promote tumor angiogenesis - influence of platelets and fibrin bundles on the behavior of breast tumor cells. ONCOTARGET, v. 8, n. 10, p. 16851-16874, 2017. (12/19851-8, 09/53766-5, 12/19780-3)

ANDRADE, SHEILA SIQUEIRA; GOUVEA, IURI ESTRADA; SILVA, MARIANA CRISTINA C.; CASTRO, ELOISA DOGNANI; DE PAULA, CLAUDIA A. A.; OKAMOTO, DEBORA; OLIVEIRA, LILIAN; PERES, GIOVANI BRAVIN; OTTAIANO, TATIANA; FACINA, GIL; et al. Cathepsin K induces platelet dysfunction and affects cell signaling in breast cancer - molecularly distinct behavior of cathepsin K in breast cancer. BMC CANCER, v. 16, MAR 1 2016. (12/19851-8, 09/53766-5, 12/19780-3)