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Participação das proteínas ósseas morfogenéticas 2 e 4 endógenas na expressão do fenótipo osteoblástico em células crescidas sobre titânio com nanotopografia

Processo: 12/01291-6
Modalidade de apoio:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de dezembro de 2012 - 30 de novembro de 2014
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Odontologia - Cirurgia Buco-maxilo-facial
Pesquisador responsável:Márcio Mateus Beloti
Beneficiário:Márcio Mateus Beloti
Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Pesquisadores associados:Adalberto Luiz Rosa ; Paulo Tambasco de Oliveira
Assunto(s):Implantodontia  Ósseointegração  Titânio  Proteínas morfogenéticas ósseas  Osteoblastos  Transdução de sinais  Nanotopografia 
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:Bmp | nanotopografia | osseointegração | osteoblasto | sinalização celular | titânio | Implantodontia

Resumo

As proteínas ósseas morfogenéticas (BMPs) são citocinas pertencentes à família do fator de crescimento transformante beta (TGF-beta) e estão envolvidas em diversos processos biológicos, incluindo a diferenciação osteoblástica e a formação óssea, eventos diretamente relacionados ao processo de osseointegração de implantes de titânio (Ti). Sabe-se que superfícies de Ti com nanotopografia favorecem a mineralização da matriz extracelular; no entanto, os mecanismos celulares envolvidos não são completamente entendidos. Neste contexto, nós elaboramos a hipótese de que as BMPs endógenas, especificamente as BMP-2/4, sabidamente osteogênicas, exercem função importante nas respostas de osteoblastos a superfícies de Ti nanoestruturadas. Previamente ao teste da hipótese, células pré-osteoblásticas da linhagem MC3T3-E1 serão cultivadas para avaliar: (1) a expressão gênica e proteica das BMP-2/4 em culturas crescidas sobre poliestireno, por Real-time PCR e ELISA; (2) a eficácia dos silenciadores (shRNA) para BMPR1A, Smad-4, Smad-6, Smurf-1 e Smurf 2 em silenciar a expressão das respectivas proteínas, todas envolvidas nas vias de sinalização das BMP-2/4, em culturas crescidas sobre poliestireno, por Western blot; e (3) o efeito dos silenciadores sobre as vias de sinalização das BMP-2/4 e sobre a expressão do fenótipo osteoblástico em culturas crescidas sobre poliestireno, por PCR-array e Western blot. Em seguida a hipótese será testada por avaliar: (1) o efeito da nanotopografia de superfície de Ti, comparada à superfície de Ti com microtopografia (controle), sobre a síntese de BMP-2/4 em culturas crescidas sobre essas superfícies, por Real-time PCR e ELISA; e (2) o efeito dos silenciadores sobre as vias de sinalização das BMP-2/4 e sobre a expressão do fenótipo osteoblástico em culturas crescidas sobre superfície de Ti com nanotopografia comparada à superfície de Ti controle, por PCR-array e Western blot. Os resultados desse estudo podem contribuir para o entendimento dos mecanismos intracelulares envolvidos nas respostas de osteoblastos a superfícies de Ti e, consequentemente, para o desenvolvimento de novas estratégias envolvendo BMPs e nanotopografia de superfície que favoreçam os eventos relacionados ao processo de osseointegração. (AU)

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Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
FLORES ABUNA, RODRIGO PAOLO; STRINGHETTA-GARCIA, CAMILA TAMI; FIORI, LEONARDO PIMENTEL; MENEGATI DORNELLES, RITA CASSIA; ROSA, ADALBERTO LUIZ; BELOTI, MARCIO MATEUS. Aging impairs osteoblast differentiation of mesenchymal stem cells grown on titanium by favoring adipogenesis. Journal of Applied Oral Science, v. 24, n. 4, p. 376-382, . (12/01291-6)
SILVA, HEITOR F.; ABUNA, RODRIGO P. F.; LOPES, HELENA B.; FRANCISCHINI, MARCELO S.; DE OLIVEIRA, PAULO T.; ROSA, ADALBERTO L.; BELOTI, MARCIO M.. Participation of extracellular signal-regulated kinases 1/2 in osteoblast and adipocyte differentiation of mesenchymal stem cells grown on titanium surfaces. European Journal of Oral Sciences, v. 125, n. 5, p. 355-360, . (16/00182-0, 12/01291-6)
SILVA, H. F.; ABUNA, R. P.; LOPES, H. B.; OLIVEIRA, P. T.; ROSA, A. L.; BELOTI, M. M.. Participation of ERK1/2 in osteoblast and adipocyte differentiation of mesenchymal stem cells induced by distinct titanium surface topographies.. MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL, v. 27, p. 2-pg., . (16/00182-0, 12/01291-6, 16/15774-0)

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