Busca avançada
Ano de início
Entree

Avaliação da osteogênese e dos perfis transcricionais (RNAm e microRNAs) de células osteoblásticas da calvária e da medula óssea de ratas submetidas à condição de osteoporose

Processo: 12/17747-9
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de janeiro de 2013 - 31 de dezembro de 2014
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Morfologia - Citologia e Biologia Celular
Pesquisador responsável:Karina Fittipaldi Bombonato Prado
Beneficiário:Karina Fittipaldi Bombonato Prado
Instituição-sede: Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto (FORP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Pesq. associados:Adalberto Luiz Rosa ; Geraldo Aleixo da Silva Passos Júnior ; Márcio Mateus Beloti ; Paulo Tambasco de Oliveira ; Selma Siéssere
Bolsa(s) vinculada(s):13/00948-4 - Avaliação da osteogênese dè células osteoblásticas da calvária e da medula óssea dè ratas induzidas à osteoporose, BP.TT
Assunto(s):Cultura de células  Osteoblastos  Osteogênese  Células-tronco mesenquimais  Expressão gênica  MicroRNAs  RNA mensageiro  Osteoporose 

Resumo

Atualmente, as células mesenquimais de diversas origens são consideradas fontes para substituição de tecidos. Estas células têm potencial osteogênico e podem ser elegíveis para o reparo e manutenção do tecido ósseo, sendo muito atrativas para a engenharia tecidual. Entretanto, mudanças no seu comportamento podem ser causadas por fatores como a osteoporose, afetando a sua habilidade de auto-renovação e diferenciação. Sendo assim, o objetivo do presente projeto é comparar a expressão gênica de células mesenquimais provenientes da medula óssea diferenciadas em células osteoblásticas com o de células osteoblásticas provenientes da calvária de ratas submetidas à condição de osteoporose. Serão utilizadas 18 ratas Wistar divididas em grupos controle e tratado (indução da osteoporose). As ratas do grupo tratado serão submetidas à ovariectomia bilateral através de protocolo adequado e após 150 dias da cirurgia, as ratas de ambos os grupos serão sacrificadas para coleta dos fêmures e de fragmentos da calvária. Os experimentos serão realizados em triplicata e a partir dos materiais coletados, serão isoladas as células mesenquimais da medula óssea e as células osteoblásticas da calvária e colocadas em garrafas com meio de cultura suplementado (osteogênico) para proliferação e posterior plaqueamento em placas de 24 poços (n=5) para avaliação dos seguintes parâmetros: proliferação e viabilidade celular, quantidade de proteína total e atividade de fosfatase alcalina (ALP), detecção e quantificação de nódulos mineralizados e análise da expressão de proteínas associadas à osteogênese por meio de imunofluorescência e PCR em tempo real. Além disso, será realizada a avaliação do perfil transcricional (RNAm e microRNAs) e construção de redes gênicas. Os dados dos ensaios bioquímicos serão analisados com o auxílio de programas de estatística para pd0.05 assim como programas de bioinformática especializados serão utilizados para avaliar os dados do perfil transcricional. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SEMEGHINI, MAYARA SGARBI; DE AZEVEDO, FERNANDA GRILO; FERNANDES, ROGER RODRIGO; ASSIS, AMANDA FREIRE; DERNOWSEK, JANAINA ANDREA; ROSA, ADALBERTO LUIZ; SIESSERE, SELMA; PASSOS, GERALDO ALEIXO; BOMBONATO-PRADO, KARINA FITTIPALDI. Menopause transition promotes distinct modulation of mRNAs and miRNAs expression in calvaria and bone marrow osteoblastic cells. Cell Biology International, v. 42, n. 1, p. 12-24, JAN 2018. Citações Web of Science: 3.

Por favor, reporte erros na lista de publicações científicas escrevendo para: cdi@fapesp.br.