Ácidos graxos poli-insaturados como moduladores da sinalização vanilóide no retinoblastoma humano

• Processo: 12/18522-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de janeiro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2014
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Fisiologia - Fisiologia de Órgãos e Sistemas
• Pesquisador responsável: Luiz Roberto Giorgetti de Britto
• Beneficiário: Luiz Roberto Giorgetti de Britto
• Instituição Sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: São Paulo
• Assunto(s): Retina Retículo endoplasmático
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Ácidos graxos poli-insaturados | estresse de reticulo endoplasmatico | Estresse oxidativo | Retinoblastoma | Trpv1 | Neurofisiologia

Resumo

O metabolismo de cálcio, a sinalização redox e o controle da produção protéica no retículo endoplasmático rugoso têm sido amplamente associados ao controle de proliferação, diferenciação e morte não só no tecido nervoso em desenvolvimento, mas também em diversos tipos de tumores de mesma origem embrionária. Dados do nosso laboratório indicam que a ativação dos receptores vanilóides TRPV1 induz apoptose durante o desenvolvimento da retina, o que é parcialmente dependente de estresse nitrosativo. Outros estudos indicam que a produção de espécies reativas de oxigênio (EROS) e o estresse de retículo endoplasmático (ERE) também podem estar envolvidos nesse processo. Nossos dados preliminares indicam que as células Y79 de retinoblastoma humano expressam esse receptor, e que sua ativação induz apoptose. Porém, embora se saiba que as células Y79 são extremamente susceptíveis à morte induzida por ácidos graxos poli-insaturados (AGPIs), em especial o ácido araquidônico, a função dos receptores TRPV1 nesses processos ainda é incerta. Assim, avaliaremos por citometria de fluxo a viabilidade celular, a fragmentação de DNA, proliferação celular, a formação de ânion superóxido e de óxido nítrico modulada por TRPV1 em células Y79 tratadas com diversos AGPIs. Nessas condições, também será estudada nitrosilação de algumas proteínas envolvidas na formação de EROs (biotinilização de proteínas nitrosiladas), bem como a expressão de mRNA (por RT-PCR em tempo real) e protéica (por immunoblotting) de diversas moléculas envolvidas no balanço redox e no ERE. Por microscopia confocal, avaliaremos a migração para a membrana de proteínas sinalizadoras do complexo NADPH oxidase. Esperamos que esses resultados possam contribuir para o conhecimento geral dos mecanismos envolvidos no desenvolvimento da retina, assim como possam permitir novos avanços na prevenção ou tratamento de tumores como o retinoblastoma. (AU)