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Fluorímetro simplificado para medição de atividade da enzima conversora da angiotensina (ECA) em fluídos biológicos

Resumo

A Enzima Conversora de Angiotensina (ECA) é uma metalopeptidase que participa de diversos processos que ocorrem no organismo, entre eles a regulação da pressão arterial. A dosagem de ECA em fluidos biológicos tem grande importância clínica pois, entre outras aplicações, a medição da atividade sérica da ECA auxilia o monitoramento de pacientes com hipertensão arterial tratados com inibidores. O método utilizado hoje, em alguns laboratórios de análises clínicas brasileiros, é baseado na medida da variação da absorbância em 340 nanômetros de uma solução que contém o soro e o substrato sintético F APGG, produzido pela Sigma. Além da necessidade da utilização de um espectrofotômetro UV, este método tem como desvantagem a baixa sensibilidade dos métodos espectrofotométricos quando comparados com métodos fluorimétricos. Desenvolvemos recentemente um substrato fluorogênico, excitável por luz de comprimento de onda de 355nm, capaz de realizar a medição da atividade da ECA (patente depositada). O objetivo do presente projeto é desenvolver um fluorímetro simplificado para medição da atividade da ECA em fluidos biológicos, utilizando este substrato. O fluorímetro terá como fonte de luz de excitação um LED de ultra-violeta, e como detector da fluorescência emitida, um fotosensor de silício. Isto faz com que ele seja mais robusto, tenha menor custo e manutenção mais simples que os equipamentos hoje utilizados em análises clínicas. Este fluorímetro deve ser composto de partes ópticas e eletrônicas acondicionadas em uma caixa que permita vedação contra luz espúria e, ao mesmo tempo, facilite o manuseio de cubetas com os líquidos biológicos. Esperamos, nesta primeira fase, provar ser possível a obtenção dê medidas da atividade da ECA fidedignas, utilizando um sistema inovador, sensível, robusto e de baixo custo. (AU)

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