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Purificação e caracterização da glicoproteína do vírus da raiva produzida pelos sistemas S2 (Drosophila melanogaster) e Semliki Forest Vírus recombinante

Processo: 12/24647-0
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2013 - 31 de maio de 2015
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Imunologia
Pesquisador responsável:Renato Mancini Astray
Beneficiário:Renato Mancini Astray
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Pesq. associados:Carlos Augusto Pereira ; Elisabeth de Fatima Pires Augusto ; Soraia Attie Calil Jorge
Bolsa(s) vinculada(s):15/03797-2 - Análise do conteúdo de DNA e RNA da glicoproteína do vírus da raiva em células S2MtRVGP, selecionadas por metodologia imunomagnética, BP.TT
14/03415-0 - Análise do conteúdo de DNA e RNA da glicoproteína do vírus da raiva em células S2MtRVGP, selecionadas por metodologia imunomagnética, BP.TT
Assunto(s):Glicoproteínas  Vírus da raiva  Drosophila melanogaster  Vírus da Floresta de Semliki  Biotecnologia 

Resumo

A glicoproteína recombinante do vírus da raiva (RVGP) tem sido produzida e estudada pelo laboratório de Imunologia Viral, com a finalidade de obtenção de um eficaz imunógeno e potencial candidato a uma vacina de terceira geração contra a raiva. Para esse fim, dois sistemas têm sido amplamente estudados: células Schneider 2 - S2 - de Drosophila melanogaster e o vírus Semliki Forest (SFV). A RVGP produzida por esses sistemas já foi utilizada em experimentos de imunização apresentando características imunogênicas importantes. Neste projeto primeiramente obteremos uma linhagem de células S2 expressando grandes quantidades da RVGP com cauda de histidina. Em seguida, a RVGP proveniente de cultivos S2 e de células de mamíferos infectadas com SFV será purificada com auxílio da cauda de histidina presente em ambas as construções. A RVGP recombinante será então caracterizada físico-química e antigenicamente. Para isso aplicaremos técnicas de preparação membranária a partir das células expressando a RVGP, solubilização da RVGP recombinante a partir das membranas e aplicação de técnicas de purificação, principalmente ultracentrifugação, cromatografia e imunoprecipitação. No desenvolvimento dessas atividades, faremos ainda um estudo das linhagens de células de mamíferos mais adequadas para a infecção com SFV, analisando a capacidade de penetração do vírus e a produção da RVGP. (AU)

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
SANTOS, NAYARA G. L.; ROCCA, MAYRA P.; PEREIRA, CARLOS A.; VENTINI, DANIELLA C.; PUGLIA, ANA LIA P.; JORGE, SORAIA A. C.; LEMOS, MARCOS A. N.; ASTRAY, RENATO M. Impact of recombinant Drosophila S2 cell population enrichment on expression of rabies virus glycoprotein. Cytotechnology, v. 68, n. 6, p. 2605-2611, DEC 2016. Citações Web of Science: 3.

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