Geração e análise da imunogenicidade de proteínas recombinantes baseadas nas diferentes formas do antígeno circumsporozoíta de Plasmodium vivax visando o desenvolvimento de uma vacina universal contra malária

• Processo: 09/15132-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Temático
• Vigência: 01 de abril de 2010 - 30 de junho de 2013
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Imunologia - Imunologia Aplicada
• Pesquisador responsável: Maurício Martins Rodrigues
• Beneficiário: Maurício Martins Rodrigues
• Instituição Sede: Centro de Terapia Celular e Molecular. Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
• Bolsa(s) vinculada(s): 12/11731-3 - Desenvolvimento de uma vacina universal contra malária utilizando protocolos de prime-boost heterólogo com vetor adenoviral humano do tipo 5 deficiente em replicação expressando epítopos imunodominantes das diferentes formas alélicas do antígeno CS, BP.IC; 12/04305-8 - Geração de proteínas recombinantes em Pichia pastoris baseadas nas diferentes formas do antígeno circumsporozoíta de Plasmodium vivax visando o desenvolvimento de uma vacina universal contra malária, BP.DR; 11/03621-0 - Geração e análise da imunogenicidade de proteínas recombinantes de fusão contendo os diferentes epítopos imunodominantes do antígeno circumsporozoíta de Plasmodium vivax e o agonista da imunidade inata flagelina FliC de Salmonella typhimurium, BP.MS; 11/02098-2 - Geração e análise da imunogenicidade de proteínas recombinantes baseadas nas diferentes formas do antígeno circumsporozoíta de Plasmodium vivax visando o desenvolvimento de uma vacina universal contra malária, BP.PD; 10/09360-1 - Geração e imunogenicidade de proteínas recombinantes contendo epítopos da proteína do circumsporozoíta do Plasmodium vivax expressa em fusão com proteínas bacteriana e viral., BP.PD
• Assunto(s): Vacinas Vacinas sintéticas Plasmodium vivax
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Plasmodium vivax | Vacinas recombinantes | Imunologia de vacinas

Resumo

O P. vivax é a segunda mais prevalente espécie causadora de malária no mundo. Dados recentes estimam que ocorra de 132-391 milhões de casos anualmente. Nas Américas, o P. vivax é responsável por mais de 70% dos casos de malária sendo considerada como a espécie mais prevalente de plasmódio. A relativa ineficiência das medidas de controle atualmente empregadas exige o desenvolvimento de novas estratégias de prevenção, como vacinas, novas drogas e novos inseticidas Apesar de uma constante e crescente atividade de pesquisa, ainda não existe uma vacina capaz de impedir a infecção pelo Plasmodium spp. Entretanto, análises experimentais sugerem que a indução de uma imunidade protetora contra as formas pré-eritrocíticas da malária possa ser um objetivo tangível já que: 1) imunizações com formas esporozoítas irradiadas são capazes de induzir proteção assintomática em diversos hospedeiro inclusive o homem; 2) vacinações experimentais em modelos de infecções murinas demonstraram que compostos sintéticos e/ou recombinantes baseados na proteína do circumsporozoíta (CS) são capazes de gerar potente imunidade protetora contra o desafio com esporozoítas de P. berghei ou P. yoelli; 3) vacinações em crianças com uma proteína recombinante baseada na proteína CS de P. falciparum induziu significativo grau de proteção contra a exposição natural a malária. Apesar de que nos últimos 12 anos geramos diversas proteínas recombinantes de antígenos imunodominantes das formas eritrocíticas de P. vivax, é nossa hipótese que uma formulação vacinal eficaz para a indução de resposta imune protetora contra o P. vivax deverá conter regiões imunodominantes de várias formas do parasita. Esta estratégia visa aumentar a intensidade da resposta imune e o número de alvos por parasita. Visa também reduzir o impacto do polimorfismo genético e a possibilidade de seleção de variantes antigênicas. Para tal, necessitaremos de diversos antígenos expressos em diferentes formas do parasita. Assim, será o objetivo deste projeto a geração de proteínas recombinantes baseadas nas sequências primárias das proteínas CS expressas por formas pré-eritrocíticas de diferentes variantes de P. vivax. Estas proteínas serão produzidas inicialmente em sistema de expressão bacteriana, purificadas e utilizadas para ensaios de imunizações experimentais em modelos animais. Tentaremos gerar três proteínas contendo cada uma das três regiões imunodominantes repetidas e uma quarta contendo todas as três regiões em fusão num mesmo polipeptídio. As proteínas serão injetadas em camundongos na presença de diferentes formulações de adjuvantes baseadas em nossa experiência anterior com vacinações experimentais com proteínas recombinantes. A comparação da resposta imune será feita entre animais que receberam simultaneamente as três proteínas recombinantes representando cada forma do antígeno, com animais que receberam somente uma proteína contendo as três regiões em fusão. Em paralelo iremos produzir a proteína CS contendo todas as três regiões imunodominantes em fusão num mesmo polipeptídio para serem expressas por adenovírus humano ou símio deficientes em replicação. Estes vírus recombinantes serão utilizados para compor um protocolo de prime e boost heterólogo junto com as proteínas recombinantes. Ao final deste projeto esperamos ter do ponto de vista aplicado, uma ou mais proteínas recombinantes que possam servir para futuras imunizações clínicas nos testes de uma vacina contra a malária causada pelo P. vivax. Do ponto de vista da geração de conhecimento básico pretendemos responder a uma questão importante para o desenvolvimento de imunidade e vacinas: se é possível expressar simultaneamente três epítopos imunodominantes numa mesma proteína sem causar interferência na resposta imune de uma sobre a outra. (AU)

Publicações científicas

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(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

ARIZA CAMACHO, ARIANE GUGLIELMI; TEIXEIRA, LAIS HELENA; BARGIERI, DANIEL YOUSSEF; BOSCARDIN, SILVIA BEATRIZ; SOARES, IRENE DA SILVA; NUSSENZWEIG, RUTH SONNTAG; NUSSENZWEIG, VICTOR; RODRIGUES, MAURICIO MARTINS. TLR5-dependent immunogenicity of a recombinant fusion protein containing an immunodominant epitope of malarial circumsporozoite protein and the FliC flagellin of Salmonella Typhimurium. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 106, n. 1, p. 167-171, AUG 2011. (09/15132-4)

LIMA-JUNIOR, JOSUE C.; RODRIGUES-DA-SILVA, RODRIGO N.; BANIC, DALMA M.; JIANG, JIANLIN; SINGH, BALWAN; FABRICIO-SILVA, GUSTAVO M.; PORTO, LUIS C. S.; MEYER, ESMERALDA V. S.; MORENO, ALBERTO; RODRIGUES, MAURICIO M.; et al. Influence of HLA-DRB1 and HLA-DQB1 Alleles on IgG Antibody Response to the P. vivax MSP-1, MSP-3 alpha and MSP-9 in Individuals from Brazilian Endemic Area. PLoS One, v. 7, n. 5, MAY 23 2012. (09/15132-4)

ANDRADE LEAL, MONICA TEIXEIRA; ARIZA CAMACHO, ARIANE GUGLIELMI; TEIXEIRA, LAIS HELENA; BARGIERI, DANIEL YOUSSEF; SOARES, IRENE SILVA; TARARAM, CIBELE APARECIDA; RODRIGUES, MAURICIO M.. Immunogenicity of Recombinant Proteins Consisting of Plasmodium vivax Circumsporozoite Protein Allelic Variant-Derived Epitopes Fused with Salmonella enterica Serovar Typhimurium Flagellin. Clinical and Vaccine Immunology, v. 20, n. 9, p. 1418-1425, SEP 2013. (09/15132-4)

ARIZA CAMACHO, ARIANE GUGLIELMI; TEIXEIRA, LAIS HELENA; BARGIERI, DANIEL YOUSSEF; BOSCARDIN, SILVIA BEATRIZ; SOARES, IRENE DA SILVA; NUSSENZWEIG, RUTH SONNTAG; NUSSENZWEIG, VICTOR; RODRIGUES, MAURICIO MARTINS. TLR5-dependent immunogenicity of a recombinant fusion protein containing an immunodominant epitope of malarial circumsporozoite protein and the FliC flagellin of Salmonella Typhimurium. Memórias do Instituto Oswaldo Cruz, v. 106, p. 5-pg., 2011-08-01. (09/15132-4)