Resumo
Clonagem e caracterização da expressão gênica da ubiquitina de A. nidulans em diferentes condições de estresse. As proteínas anormais surgem continuamente durante qualquer processo de estresse celular visando evitar níveis tóxicos na célula, a remoção rápida destas proteínas aberrantes é de suma importância. Uma variedade de evidências genéticas e bioquímicas indicam que a conjugação com ubiquitina é um passo obrigatório na pré-degradação da proteína. Nós estamos interessados em estudar a expressão da ubiquitina de Aspergillus nidulans durante diferentes processos de estresse celular, assim, os objetivos específicos são: (i) a clonagem do(s) gene(s) que codifica(m) a ubiquitina em A. nidulans; (ii) a caracterização da expressão destes genes em diferentes condições de estresse e (iii) a deleção ou gene disruption deste(s) gene(s); (iv) regulação do metabolismo de trealose em Neurospora crassa e sua relação com condições de estresse. Achados recentes demonstram o envolvimento da trealose na adaptação das células microbianas a diversas situações de estresse ambiental (temperatura, dessecação, estresse oxidativo). Nosso laboratório pesquisando o metabolismo de trealose frente a situações de estresse, utilizando como modelos fungos filamentosos mesofílicos: Neurospora crassa, Aspergillus nidulans, Mucor rouxii, e termofílicos: Humicola grisea, Scytalidium termophilum e Chaetomium thermophilum. As principais metas são: (1) clonagem e caracterização funcional das trealases neutras de N. crassa e M. rouxii; (2) caracterização bioquímica do sistema de síntese de trealose em N. crassa e M. rouxii; (3) clonagem e caracterização funcional do gene tps1 (trealose-6-fosfato sintase) de N. crassa; (4) caracterização bioquímica das trealases ca2 + - dependentes de fungos termofílicos. (AU)
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