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Investigação sorológica e molecular de Toxoplasma gondii em doadores de sangue

Resumo

A infecção por Toxoplasma gondii, agente etiológico da toxoplasmose, apresenta distribuição mundial e acomete humanos de todas as idades e etnias. A disseminação da infecção se da por diferentes formas, incluindo a transfusão de hemocomponentes. Em indivíduos imunocompetentes este parasito não oferece grandes riscos, porém em indivíduos imuncomprometidos o acometimento pode ser grave e acarretar alta mortalidade. Objetivos. O objetivo geral deste projeto é detectar com o uso de métodos sorológicos e caracterizar com o uso de métodos moleculares a infecção por T. gondii em doadores de sangue. Seus objetivos específicos compreendem: 1. Realizar a triagem sorológica para anticorpos anti-T. gondii (IgM e IgG) em candidatos aptos à doação de sangue e identificar seus perfis [(IgM não reagente; IgG não reagente); (IgM reagente; IgG não reagente); (IgM reagente; IgG reagente); (IgM não reagente; IgG reagente)]. 2. Detectar a presença de DNA genômico de T. gondii no sangue periférico dos doadores com o uso dos métodos de amplificação gênica (PCR convencional e PCR em tempo real). 3. Caracterizar, nos doadores com PCR positivo, os genótipos de T. gondii com o uso dos marcadores moleculares. 4. Rastrear as unidades de hemocomponentes que apresentarem resultado positivo por IgM e PCR (cn PCR e RT-PCR) e avaliar seus receptores com o uso dos mesmos métodos sorológicos e moleculares. Casuística e métodos. Serão selecionados pelo menos 2000 doadores de sangue aptos à doação, no Hemocentro de São José do Rio Preto, Estado de São Paulo. Para cada doador será preenchida uma ficha de dados epidemiológicos e serão colhidas duas amostras de sangue periférico no momento da doação. Uma será utilizada para a pesquisa de anticorpos (IgM e IgG) anti-T. gondii, com o uso do método ELISA. A outra será utilizada para a extração do DNA genômico com o uso de kits comerciais. A amplificação gênica do T. gondii será realizada por PCR convencional (cnPCR) e PCR em tempo real (qPCR). As amostras com resultado positivo por PCR serão genotipadas com o uso dos marcadores SAG1, SAG2 (50-and 30-SAG2, alt.SAG2) SAG3, BTUB, GRA6, C22-8, c29-2, L358, PK1 and Apico. Conforme o perfil sorológico, obtido a partir do método ELISA, os doadores de sangue serão separados em quatro grupos (G1, G2, G3 e G4). No G1 serão incluídos os doadores com perfil sorológicos IgM e IgG não reagentes. Em G2, serão incluídos aqueles com IgM e IgG reagente; em G3, aqueles IgM reagente e IgG não reagente; e G4 IgM não reagente e IgG reagente. Todos estes grupos serão confrontados com o resultado do PCR para T. gondii. Os resultados obtidos e os PCR serão comparados entre si com o uso dos testes Ç2 e exato de Fisher, quando for o caso. Também serão calculados os valores de Odds Ratio e do intervalo de confiança a 95%. Resultados esperados. Espera-se que os resultados a serem alcançados com este projeto contribuam para conhecer se o T. gondii circula no sangue periférico de doadores e que permitam estimar que riscos a presença de tal parasito oferece aos pacientes que necessitam de transfusão de hemocomponentes. (AU)

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Publicações científicas (7)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
MURATA, FERNANDO HENRIQUE ANTUNES; PREVIATO, MARIANA; FREDERICO, FABIO BATISTA; BARBOSA, AMANDA PIRES; NAKASHIMA, FABIANA; DE FARIA, JR., GERALDO MAGELA; SILVEIRA CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; MEIRA STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; CASTIGLIONI, LILIAN; et al. Evaluation of Serological and Molecular Tests Used for the Identification of Toxoplasma gondii Infection in Patients Treated in an Ophthalmology Clinic of a Public Health Service in Sao Paulo State, Brazil. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, . (13/10050-5, 13/15879-8, 12/07716-9, 18/09448-8, 14/05302-8, 12/07750-2, 18/04709-8)
MIOLA, MARCOS PAULO; COLOMBO, TATIANA ELIAS; FACHINI, ROBERTA MARIA; RICCI-JUNIOR, OCTAVIO; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. Anti-A and anti-A,B monoclonal antisera with high titers favor the detection of A weak phenotypes. TRANSFUSION AND APHERESIS SCIENCE, v. 59, n. 5, . (12/07716-9)
ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; FERREIRA, MARINA NEVES; CAMARGO, NATALIA SAHYOUN; SANTOS, GABRIELA SORIA; JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN, LIGIA COSENTINO; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; DE MATTOS, LUIZ CARLOS; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA. Frequency of anti-Toxoplasma gondii IgA, IgM, and IgG antibodies in high-risk pregnancies, in Brazil. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 49, n. 4, p. 512-514, . (12/07716-9, 14/01706-7, 14/09496-1, 13/15879-8)
ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; FERREIRA, MARINA NEVES; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN, LIGIA COSENTINO; MEIRA-STREJEVITCH, CRISTINA DA SILVA; GAVA, RICARDO; SILVEIRA-CARVALHO, APARECIDA PERPETUO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; GRP, FAMERP TOXOPLASMA RES. Evaluation of serological and molecular tests used to identify Toxoplasma gondii infection in pregnant women attended in a public health service in Sao Paulo state, Brazil. DIAGNOSTIC MICROBIOLOGY AND INFECTIOUS DISEASE, v. 89, n. 1, p. 13-19, . (14/09496-1, 13/15879-8, 12/07716-9, 14/05302-8, 14/01706-7, 12/07750-2)
FERNANDO HENRIQUE ANTUNES MURATA; MARINA NEVES FERREIRA; NATÁLIA SAHYOUN CAMARGO; GABRIELA SORIA SANTOS; LÍGIA COSENTINO JUNQUEIRA FRANCO SPEGIORIN; APARECIDA PERPÉTUO SILVEIRA-CARVALHO; VERA LUCIA PEREIRA-CHIOCCOLA; LUIZ CARLOS DE MATTOS; CINARA CÁSSIA BRANDÃO DE MATTOS. Frequency of anti- Toxoplasma gondii IgA, IgM, and IgG antibodies in high-risk pregnancies, in Brazil. Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical, v. 49, n. 4, p. 512-514, . (14/01706-7, 13/15879-8, 12/07716-9)
DE MATTOS, LUIZ CARLOS; FERREIRA, ANA IARA COSTA; DE OLIVEIRA, KARINA YOUNAN; NAKASHIMA, FABIANA; BRANDAO, CINARA CASSIA. The Potential Contribution of ABO, Lewis and Secretor Histo-Blood Group Carbohydrates in Infection by Toxoplasma gondii. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 11, . (09/17540-2, 12/07716-9)
NAKASHIMA, FABIANA; PARDO, VALQUIRIA SOUSA; MIOLA, MARCOS PAULO; ANTUNES MURATA, FERNANDO HENRIQUE; PADUAN, NATALIA; LONGO, STEFANI MIQUELINE; BRANDAO DE MATTOS, CINARA CASSIA; PEREIRA-CHIOCCOLA, VERA LUCIA; RICCI, OCTAVIO; DE MATTOS, LUIZ CARLOS. Serum IgG Anti-Toxoplasma gondii Antibody Concentrations Do Not Correlate Nested PCR Results in Blood Donors. FRONTIERS IN CELLULAR AND INFECTION MICROBIOLOGY, v. 9, . (12/07716-9, 12/07750-2, 13/15879-8, 14/00900-4, 11/13939-8)

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