| Processo: | 13/03495-0 |
| Modalidade de apoio: | Auxílio à Pesquisa - Regular |
| Data de Início da vigência: | 01 de agosto de 2013 |
| Data de Término da vigência: | 31 de julho de 2015 |
| Área do conhecimento: | Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal |
| Pesquisador responsável: | José Antonio Visintin |
| Beneficiário: | José Antonio Visintin |
| Instituição Sede: | Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil |
| Município da Instituição Sede: | São Paulo |
| Pesquisadores associados: | Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao |
| Assunto(s): | Cultura de células Células-tronco espermatogoniais Marcador molecular Expressão gênica Bovinos |
| Palavra(s)-Chave do Pesquisador: | bovinos | Células-tronco espermatogoniais | Cultivo celular | marcadores moleculares | Cultivo de células tronco espermatogoniais |
Resumo
Células-tronco espermatogoniais (SSCs) são as responsáveis por manter a espermatogênese contínua durante a vida de um indivíduo. Estas células podem ser isoladas e transplantadas de modo a colonizar testículos e reconstituir sua funcionalidade. Entretanto, métodos de seleção e marcadores moleculares não isolam exclusivamente as verdadeiras células-tronco do testículo e estudos de caracterização destas células em bovinos são mais escassos que em murinos. Neste projeto, pretende-se testar a hipótese que SOX2, NANOG ou OCT4 são marcadores de SSCs indiferenciadas em bovinos em três experimentos. Primeiro, será verificado qual método é mais eficiente para seleção inicial de espermatogônias. Em seguida, a expressão dos genes mencionados será verificada no parênquima testicular, assim como a co-localização desta proteína com outras já utilizadas para marcação de SSCs. Na sequência, pretende-se identificar genes diferencialmente expressos em populações que expressam ou não um desses marcadores. Em um quarto experimento, pretende-se transplantar células espermatogoniais isoladas por separação magnética para avaliar a formação de colônias. No quinto e último experimento, células espermatogoniais isoladas serão cultivadas in vitro, para avaliar a manutenção do estado de células-tronco. Espera-se com este projeto identificar um marcador de SSC indiferenciadas bovinas, assim como identificar marcadores de membrana que estejam presentes nesta população de células. Desta maneira, espera-se obter uma população celular que seja mais eficiente na colonização testicular após transplante e capazes de se manter em cultivo in vitro. (AU)
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