Identificação e cultivo de células-tronco espermatogoniais indiferenciadas em bovinos

• Processo: 13/03495-0
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de agosto de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de julho de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: José Antonio Visintin
• Beneficiário: José Antonio Visintin
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Mayra Elena Ortiz D' Avila Assumpcao
• Assunto(s): Cultura de células Células-tronco espermatogoniais Marcador molecular Expressão gênica Bovinos
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: bovinos | Células-tronco espermatogoniais | Cultivo celular | marcadores moleculares | Cultivo de células tronco espermatogoniais

Resumo

Células-tronco espermatogoniais (SSCs) são as responsáveis por manter a espermatogênese contínua durante a vida de um indivíduo. Estas células podem ser isoladas e transplantadas de modo a colonizar testículos e reconstituir sua funcionalidade. Entretanto, métodos de seleção e marcadores moleculares não isolam exclusivamente as verdadeiras células-tronco do testículo e estudos de caracterização destas células em bovinos são mais escassos que em murinos. Neste projeto, pretende-se testar a hipótese que SOX2, NANOG ou OCT4 são marcadores de SSCs indiferenciadas em bovinos em três experimentos. Primeiro, será verificado qual método é mais eficiente para seleção inicial de espermatogônias. Em seguida, a expressão dos genes mencionados será verificada no parênquima testicular, assim como a co-localização desta proteína com outras já utilizadas para marcação de SSCs. Na sequência, pretende-se identificar genes diferencialmente expressos em populações que expressam ou não um desses marcadores. Em um quarto experimento, pretende-se transplantar células espermatogoniais isoladas por separação magnética para avaliar a formação de colônias. No quinto e último experimento, células espermatogoniais isoladas serão cultivadas in vitro, para avaliar a manutenção do estado de células-tronco. Espera-se com este projeto identificar um marcador de SSC indiferenciadas bovinas, assim como identificar marcadores de membrana que estejam presentes nesta população de células. Desta maneira, espera-se obter uma população celular que seja mais eficiente na colonização testicular após transplante e capazes de se manter em cultivo in vitro. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

GOISSIS, MARCELO D.; GIASSETTI, MARIANA I.; WORST, ROBINSON A.; MENDES, CAMILLA M.; MOREIRA, PEDRO V.; ASSUMPCAO, MAYRA E. O. A.; VISINTIN, JOSE A.. Spermatogonial stem cell potential of CXCR4-positive cells from prepubertal bull testes. Animal Reproduction Science, v. 196, p. 219-229, SEP 2018. (13/03495-0, 12/16157-3)

GIASSETTI, M. I.; GOISSIS, M. D.; DE BARROS, F. R. O.; BRUNO, A. H.; ASSUMPCAO, M. E. O. A.; VISINTIN, J. A.. Comparison of Diverse Differential Plating Methods to Enrich Bovine Spermatogonial Cells. REPRODUCTION IN DOMESTIC ANIMALS, v. 51, n. 1, p. 26-32, FEB 2016. (12/05474-8, 13/03495-0, 11/20115-1)