Efeito da pré-exposição de veias e artérias de ratos ao novo doador de óxido nítrico (RuBPY)

• Processo: 13/07310-5
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2013
• Data de Término da vigência: 30 de novembro de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Farmacologia - Farmacologia Cardiorenal
• Pesquisador responsável: Lusiane Maria Bendhack
• Beneficiário: Lusiane Maria Bendhack
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
• Município da Instituição Sede: Ribeirão Preto
• Assunto(s): Doenças cardiovasculares Vasodilatação Citotoxicidade Nitratos Óxido nítrico sintase Doadores de óxido nítrico Nitrosilos de rutênio
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: NO-sintase | Oxido Nitrico | Tolerância a Nitratos | Vasodilatação | Biologia Vascular

Resumo

Doadores de óxido nítrico (NO) são utilizados como ferramenta farmacológica para melhor compreensão do efeito fisiológico do NO, assim como para o tratamento de doenças cardiovasculares. Entre os doadores existentes, a nitroglicerina (trinitato de glicerina - NTG) e o nitroprussiato de sódio (NPS) têm sido utilizados no tratamento de doenças cardiovasculares. Estudos in vivo e in vitro demonstraram importantes limitações clínicas no uso desses doadores, como desenvolvimento de tolerância (NTG) e toxicidade devido à liberação de cianeto pelo NPS. A tolerância aos nitratos orgânicos se caracteriza pela perda rápida de seus efeitos hemodinâmicos durante o tratamento crônico. As causas do processo de tolerância ainda não estão esclarecidas, mas acredita-se que este processo seja multifatorial e que envolva o comprometimento da produção endógena de NO pela eNOs (NOS-3). O grande benefício clínico dos nitratos orgânicos, entre eles a NTG, tem sido atribuído ao fato de relaxarem a maioria dos músculos lisos, incluindo veias, artérias e arteríolas, resultando em vasodilatação da maioria dos leitos vasculares. Seu potente efeito venodilatador resulta na redução do retorno venoso, da pré-carga cardíaca e da demanda de oxigênio pelo miocárdio. O efeito predominante nas doses terapêuticas é a redução da pré-carga devido à venodilatação e aumento da capacitância venosa. Nosso grupo de pesquisa tem estudado diversos complexos nitrosilos de rutênio, e entre eles o cis-[Ru(bpy)2(py)(NO2)](PF6), RuBPY, como novos doadores de NO. O RuBPY é capaz de liberar NO, in vivo e in vitro, na artéria aorta, artéria mesentérica de resistência e veia cava de ratos. Ao contrário do NPS, esse composto não apresenta citotoxicidade nas concentrações utilizadas para induzir relaxamento vascular máximo (EC100). A hipótese do presente trabalho é de que o RuBPY não induz tolerância em aorta e veia cava inferior de ratos devido às vias de sinalização celular envolvidas na vasodilatação ativadas por este doador de NO. O presente projeto tem por objetivo investigar se o RuBPY, induz o fenômeno de tolerância e tolerância cruzada in vitro na aorta e veia cava inferior de ratos e investigar os mecanismos celulares e moleculares envolvidos nestes processos. Em nosso projeto estudaremos a tolerância simples à pré-exposição ao RuBPY, tolerância cruzada entre RuBPY e acetilcolina e pseudo tolerância pelo aumento da produção de espécies reativas de oxigênio (EROs). Estudaremos os efeitos de inibidores das enzimas envolvidas no sistema NO-GMPc-PKG-Fosdiesterase-5, a fosforilação da NOS-3 nos sítios de ativação (Serina1177) e inativação (Treonina495) (AU)