Secreção de glicoproteínas heterólogas em Aspergillus: efeito do padrão de glicosilação em parâmetros funcionais de glicosil hidrolases

• Processo: 12/20549-4
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Programa BIOEN - Jovens Pesquisadores
• Vigência: 01 de novembro de 2013 - 30 de junho de 2018
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Microbiologia - Microbiologia Aplicada
• Pesquisador responsável: André Ricardo de Lima Damasio
• Beneficiário: André Ricardo de Lima Damasio
• Instituição Sede: Instituto de Biologia (IB). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Campinas , SP, Brasil
• Auxílios(s) vinculado(s): 18/01840-6 - 40th Symposium on Biotechnology for Fuels and Chemicals, AR.EXT; 17/22663-2 - Perfil de proteínas em cepas recombinantes de Aspergillus nidulans super-produzindo enzimas heterólogas, PUB.ART; 17/19064-0 - Caracterização estrutural e funcional de uma alfa-L-arabinofuranosidase (GH62) altamente secretada por Aspergillus nidulans cultivado em bagaço de cana-de-açucar, PUB.ART
• Bolsa(s) vinculada(s): 17/26315-9 - Influência de fatores de transcrição na secreção de enzimas em Aspergillus nidulans, BP.MS; 14/23051-2 - Análise comparativa do mecanismo de secreção de proteínas heterólogas em Aspergillus nidulans, BP.MS; 14/15403-6 - Aspergillus nidulans como modelo para manipulação de genes envolvidos no processo de "Unfolded Protein Response", BP.DR; 13/24988-5 - Secreção de glicoproteínas heterólogas em Aspergillus: efeito do padrão de glicosilação em parâmetros funcionais de glicosil hidrolases, BP.DD; 13/18910-3 - Secreção de glicoproteínas heterólogas em Aspergillus: efeito do padrão de glicosilação em parâmetros funcionais de glicosil hidrolases, BP.JP.BIOEN
• Assunto(s): Aspergillus Glicoproteínas Glicosilação Bioenergia
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Aspergillus | expressão heteróloga | glicoproteínas | glicosil hidrolases | glicosilação | unfolded protein response (UPR) | Enzimas Biotecnológicas

Resumo

Apenas um terço da biomassa de cana de açúcar é processada a etanol, enquanto os outros dois terços são descartados como bagaço e palha. Celulose e hemicelulose são os polímeros mais abundantes no bagaço de cana, e estão organizados de forma muito complexa na parede celular. Celulases e hemicelulases são glicosil hidrolases responsáveis pela completa degradação dos polissacarídeos da parede celular de plantas. A maior fonte de prospecção para produção de enzimas relacionadas a degradação de biomassa são os fungos filamentosos, destacando-se os do gênero Aspergillus. Aspergillus e Trichoderma, são extraordinários em sua capacidade de secretar grandes quantidades de proteínas para o meio de cultura. A maioria das proteínas fúngicas sofre glicosilação co- ou pós-traducional no reticulo endoplasmático (RE) e/ou complexo de Golgi, e portanto são glicoproteínas em sua essência. Contudo, esta proposta versará sobre dois grandes objetivos: 1) Efeito de N-glicanas sobre propriedades funcionais de glicosil hidrolases: Investigaremos possíveis alterações funcionais de variantes não glicosiladas, hipo- e hiper-glicosiladas de uma endo-xilanase GH11 clonada de Penicillium funiculosum. Estas alterações incluem, aumento ou redução de atividade, alteração no padrão de produtos de hidrólise, mudanças em constantes cinéticas (Km e Kcat), alterações na estrutura secundária e variações na especificidade e afinidade a diferentes substratos; 2) Expressão constitutiva de hacA induzido e cpcA (genes envolvidos no stress de RE e unfolded protein response) em A. nidulans: propomos a construção de cepas expressando constitutivamente hacAi e gcn4p/cpcA, verificando de forma sistemática a produção heteróloga de uma proteína alvo, XegA de Aspergillus clavatus (Acla_029940). (AU)

Publicações científicas

(15)

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

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