Isolamento e caracterização de populações homogêneas de células mesenquimais indiferenciadas do ligamento periodontal de humanos que apresentam alto potencial osteoblástico/cementoblástico

• Processo: 13/08919-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de dezembro de 2013
• Data de Término da vigência: 31 de maio de 2016
• Área do conhecimento: Ciências da Saúde - Odontologia - Periodontia
• Pesquisador responsável: Karina Gonzales Silvério Ruiz
• Beneficiário: Karina Gonzales Silvério Ruiz
• Instituição Sede: Faculdade de Odontologia de Piracicaba (FOP). Universidade Estadual de Campinas (UNICAMP). Piracicaba , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Francisco Humberto Nociti Junior ; Luciane Martins
• Assunto(s): Células-tronco mesenquimais Ligamento periodontal Osteoblastos Diferenciação celular Células clonais Expressão gênica
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: células mesenquimais indiferenciadas | Clonagem Celular | expressão gênica | ligamento periodontal | osteoblasto | periodontia

Resumo

Estudos realizados com o objetivo de avaliar o potencial das células progenitoras mesenquimais do ligamento periodontal na regeneração dos tecidos periodontais de suporte tem mostrado que, essas populações são altamente heterogêneas, não havendo um fenótipo celular definido como o mais favorável para esse processo regenerativo. Considerando a neoformação do cemento radicular um processo crucial para a restauração do tecido conjuntivo de suporte dos dentes acometidos pela doença periodontal, o presente estudo tem como objetivo isolar populações homogêneas de células mesenquimais indiferenciadas que apresentam alto potencial para diferenciação osteoblástica / cementoblástica e delinear suas características fenotípicas e funcionais. Utilizando-se a técnica do cilindro de clonagem, clones celulares (populações homogêneas) serão isolados a partir de três populações de células mesenquimias indiferenciadas do ligamento periodontal e caracterizados quanto: a) potencial para diferenciação osteoblástica/cementoblástica (ensaio de von Kossa, alizarina "red" e expressão dos genes para RUNX2, ALP e OCN); b) capacidade de diferenciação em células semelhantes a adipócitos (expressão dos genes para PPARgama2 e LPL, e coloração para oil red O); c) capacidade proliferativa (ensaio de MTS); d) expressão da proteína STRO-1 pela imunofluorescência; e) identificação de marcadores de superfície que são diferencialmente expressos pelos clones que adquirem ou não fenótipo osteoblástico/cementoblástico, e que sofrem modulação durante esse processo de diferenciação (expressão gênica - técnica do RNAseq; expressão de proteínas - análise pela espectometria de massa). Uma vez identificados esses marcadores de superfície, ensaios serão realizados para tentar estabelecer o padrão de sinalização pela qual esses marcadores regulam o processo de diferenciação osteoblástica/cementoblástica. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

MIKI TAKETOMI SAITO; LUCIANA SOUTO MOFATTO; MAYRA LAINO ALBIERO; MÁRCIO ZAFALLON CASATI; ENILSON ANTONIO SALLUM; FRANCISCO HUMBERTO NOCITI JUNIOR; KARINA GONZALES SILVÉRIO. Transcriptome profile of highly osteoblastic/cementoblastic periodontal ligament cell clones. Journal of Applied Oral Science, v. 28, 2020-10-23. (13/08919-3)