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Clonagem e caracterização funcional das oxidoesqualeno ciclases de Maytenus ilicifolia

Processo: 14/03819-3
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de junho de 2014 - 31 de maio de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Cleslei Fernando Zanelli
Beneficiário:Cleslei Fernando Zanelli
Instituição-sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
Pesq. associados:Maysa Furlan ; Tatiana Maria de Souza Moreira
Assunto(s):Transcriptoma  Clonagem  Expressão gênica  Triterpenos  Substâncias bioativas  Maytenus  Saccharomyces cerevisiae 

Resumo

Entre os metabólitos secundários produzidos pelas plantas, os isopenoides representam uma classe com diferentes estruturas químicas e variadas atividades biológicas. Friedelina é um derivado triterpênico encontrado nas folhas de algumas espécies como Maytenus ilicifolia, que, além de apresentar atividades biológicas, também é precursora dos quinonametídeos triterpênicos maitenina e pristimerina, promissores agentes terapêuticos no tratamento de diferentes tipos de cânceres, mas produzidos apenas na casca da raiz da planta jovem, o que dificulta a sua obtenção. No intuito de caracterizar as vias metabólicas secundárias de derivados terpênicos e controlar a sua produção, diversas espécies vegetais tiveram os genes de suas terpeno ciclases clonadas. Uma alternativa muito importante para a produção de compostos secundários é a utilização de microrganismos geneticamente modificados. A utilização desses microrganismos evita o extrativismo predatório, emprega menos solventes e, portanto, é uma prática de "química verde", além de possibilitar a manipulação genética para aumento do rendimento e tornar possível uma produção em larga escala. Desta forma, são objetivos deste projeto clonar o gene de friedelina sintase de M. ilicifolia e expressar em Saccharomyces cerevisiae geneticamente modificada para melhor produção do respectivo triterpeno. Assim, o projeto está estruturado de forma a iniciar pela identificação dos transcritos de oxidoesqualeno ciclases das folhas de M. ilicifolia e adequação dos protocolos de clonagem e expressão, partindo para a avaliação da produção de friedelina e outros compostos por métodos cromatográficos, especificidade para o produto friedelina e mutações que possam resultar em melhores perfis de produção de friedelina. (AU)

Matéria(s) publicada(s) na Revista Pesquisa FAPESP sobre o auxílio:
Aliados improváveis 

Publicações científicas
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
ALVES, THAIS B.; SOUZA-MOREIRA, TATIANA M.; VALENTINI, SANDRO R.; ZANELLI, CLESLEI E.; FURLAN, MAYSA. Friedelin in Maytenus ilicifolia Is Produced by Friedelin Synthase Isoforms. Molecules, v. 23, n. 3 MAR 2018. Citações Web of Science: 1.
SOUZA-MOREIRA, TATIANA M.; ALVES, THAS B.; PINHEIRO, KARINA A.; FELIPPE, LIDIANE G.; DE LIMA, GUSTAVO M. A.; WATANABE, TATIANA F.; BARBOSA, CRISTINA C.; SANTOS, VANIA A. F. F. M.; LOPES, NORBERTO P.; VALENTINI, SANDRO R.; GUIDO, RAFAEL V. C.; FURLAN, MAYSA; ZANELLI, CLESLEI F. Friedelin Synthase from Maytenus ilicifolia: Leucine 482 Plays an Essential Role in the Production of the Most Rearranged Pentacyclic Triterpene. SCIENTIFIC REPORTS, v. 6, NOV 22 2016. Citações Web of Science: 8.

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