Clonagem e caracterização funcional das oxidoesqualeno ciclases de Maytenus ilicifolia

• Processo: 14/03819-3
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Vigência: 01 de junho de 2014 - 31 de maio de 2016
• Área do conhecimento: Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
• Pesquisador responsável: Cleslei Fernando Zanelli
• Beneficiário: Cleslei Fernando Zanelli
• Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas (FCFAR). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Araraquara. Araraquara , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Maysa Furlan ; Tatiana Maria de Souza Moreira
• Assunto(s): Transcriptoma Clonagem Expressão gênica Triterpenos Substâncias bioativas Maytenus Saccharomyces cerevisiae
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: Maytenus | Saccharomyces cerevisiae | Transcriptoma | triterpeno sintases | Biologia Sintética

Resumo

Entre os metabólitos secundários produzidos pelas plantas, os isopenoides representam uma classe com diferentes estruturas químicas e variadas atividades biológicas. Friedelina é um derivado triterpênico encontrado nas folhas de algumas espécies como Maytenus ilicifolia, que, além de apresentar atividades biológicas, também é precursora dos quinonametídeos triterpênicos maitenina e pristimerina, promissores agentes terapêuticos no tratamento de diferentes tipos de cânceres, mas produzidos apenas na casca da raiz da planta jovem, o que dificulta a sua obtenção. No intuito de caracterizar as vias metabólicas secundárias de derivados terpênicos e controlar a sua produção, diversas espécies vegetais tiveram os genes de suas terpeno ciclases clonadas. Uma alternativa muito importante para a produção de compostos secundários é a utilização de microrganismos geneticamente modificados. A utilização desses microrganismos evita o extrativismo predatório, emprega menos solventes e, portanto, é uma prática de "química verde", além de possibilitar a manipulação genética para aumento do rendimento e tornar possível uma produção em larga escala. Desta forma, são objetivos deste projeto clonar o gene de friedelina sintase de M. ilicifolia e expressar em Saccharomyces cerevisiae geneticamente modificada para melhor produção do respectivo triterpeno. Assim, o projeto está estruturado de forma a iniciar pela identificação dos transcritos de oxidoesqualeno ciclases das folhas de M. ilicifolia e adequação dos protocolos de clonagem e expressão, partindo para a avaliação da produção de friedelina e outros compostos por métodos cromatográficos, especificidade para o produto friedelina e mutações que possam resultar em melhores perfis de produção de friedelina. (AU)

Publicações científicas

(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)

SOUZA-MOREIRA, TATIANA M.; ALVES, THAS B.; PINHEIRO, KARINA A.; FELIPPE, LIDIANE G.; DE LIMA, GUSTAVO M. A.; WATANABE, TATIANA F.; BARBOSA, CRISTINA C.; SANTOS, VANIA A. F. F. M.; LOPES, NORBERTO P.; VALENTINI, SANDRO R.; et al. Friedelin Synthase from Maytenus ilicifolia: Leucine 482 Plays an Essential Role in the Production of the Most Rearranged Pentacyclic Triterpene. SCIENTIFIC REPORTS, v. 6, NOV 22 2016. (12/21005-8, 13/07600-3, 13/15306-8, 14/03819-3, 11/10379-1, 12/09584-2)

ALVES, THAIS B.; SOUZA-MOREIRA, TATIANA M.; VALENTINI, SANDRO R.; ZANELLI, CLESLEI E.; FURLAN, MAYSA. Friedelin in Maytenus ilicifolia Is Produced by Friedelin Synthase Isoforms. Molecules, v. 23, n. 3, MAR 2018. (14/03819-3, 13/07600-3, 11/10379-1)

F. COTINGUIBA; H. M. DEBONSI; R. V. SILVA; R. M. PIOLI; R. A. PINTO; L. G. FELIPPE; S. N. LÓPEZ; M. J. KATO; M. FURLAN. Participação dos aminoácidos L-fenilalanina e L-lisina na biossíntese de piperamidas trans e cis em duas espécies de Piper. Brazilian Journal of Biology, v. 82, 2023-01-13. (06/50086-5, 11/10379-1, 14/25705-0, 07/56140-4, 14/03819-3)