Perfil lipídico da membrana plasmática e alterações morfo-funcionais de espermatozóides de garanhões resistentes e susceptíveis à criopreservação de sêmen

• Processo: 13/12838-9
• Modalidade de apoio: Auxílio à Pesquisa - Regular
• Data de Início da vigência: 01 de setembro de 2014
• Data de Término da vigência: 30 de junho de 2015
• Área do conhecimento: Ciências Agrárias - Medicina Veterinária - Reprodução Animal
• Pesquisador responsável: Marco Antonio Alvarenga
• Beneficiário: Marco Antonio Alvarenga
• Instituição Sede: Faculdade de Medicina Veterinária e Zootecnia (FMVZ). Universidade Estadual Paulista (UNESP). Campus de Botucatu. Botucatu , SP, Brasil
• Pesquisadores associados: Carlos Ramires Neto ; Frederico Ozanam Papa
• Assunto(s): Andrologia veterinária Equinos Congelamento de sêmen animal Lipídeos Membrana plasmática Espermatozoides animal Criopreservação
• Palavra(s)-Chave do Pesquisador: garanhão | lipídios | sêmen congelado | Andrologia

Resumo

A congelação de sêmen equino possibilita armazenar o material genético de garanhões por um tempo ilimitado. Entretanto, o sêmen de alguns garanhões, especialmente da raça Mangalarga Marchador, possui baixa qualidade após a descongelação. Alguns autores descreveram que composição e a proporção dos lipídios que compõem a membrana plasmática dos espermatozoides interferem sobre a resistência da célula espermática a danos decorrentes da criopreservação. Desta forma, este trabalho tem como objetivo analisar o perfil lipídico da membrana plasmática dos espermatozoides de garanhões, verificando a sua relação com a resistência destes espermatozoides à congelação. Além disso, objetiva-se verificar as diferenças morfofuncionais existentes nos espermatozoides de garanhões resistentes e sensíveis a lesões decorrentes da criopreservação. Para isso serão utilizados 80 garanhões, sendo 40 animais (20 Quarto de Milha e 20 Mangalarga Marchador) resistentes e 40 garanhões (20 Quarto de Milha e 20 Mangalarga Marchador) sensíveis a danos espermáticos decorrentes da congelação seminal. O sêmen será colhido através de vagina artificial, sendo a análise de cinética espermática e integridade de membrana plasmática realizada antes e após a congelação. Será realizada análise de cinética computadorizada do sêmen fresco e do sêmen após a descongelação. Após a descongelação serão avaliadas as alterações morfofuncionais dos espermatozoides na morfologia espermática através de microscopia diferencial de fase (DIC) e avaliação da integridade da membrana plasmática e acrossomal, nível de fragmentação de DNA, potencial mitocondrial, peroxidação lipídica, formação de radicais livres, translocação de fosfolipídios da membrana, caspase-ativada e taxa de apoptose através de citometria de fluxo. A análise do perfil lipídico da membrana plasmática espermática será realizada em diferentes momentos durante a congelação de sêmen, através da técnica de espectrometria de massa MALTI-TOF e fluorimetria. (AU)