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Efeito da fragmentação de DNA espermático no perfil lipídico de blastocisto de murinos

Processo: 14/08971-8
Linha de fomento:Auxílio à Pesquisa - Regular
Vigência: 01 de setembro de 2014 - 28 de fevereiro de 2017
Área do conhecimento:Ciências da Saúde - Medicina
Pesquisador responsável:Agnaldo Pereira Cedenho
Beneficiário:Agnaldo Pereira Cedenho
Instituição-sede: Escola Paulista de Medicina (EPM). Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP). Campus São Paulo. São Paulo , SP, Brasil
Pesq. associados:Edson Guimarães Lo Turco
Assunto(s):Biotecnologia da reprodução  Fragmentação do DNA  Embrião  Estresse térmico  Blastócito  Lipídeos  Espermatozoides 

Resumo

O estresse térmico é um dos fatores preponderantes na determinação da fragmentação de DNA dos espermatozoides. A fertilização desses espermatozoides em óvulos sadios pode acarretar em má qualidade embrionária, diminuição na taxa de implantação e abortos espontâneos. Sabe-se que há uma relação intima entre os lipídeos e a ativação metabólica no processo de fertilização, fusão de membranas e descondensação dos grânulos corticais. Entretanto não está bem estabelecida qual o perfil de lipídeos que está relacionado com o desenvolvimento embrionário à blastocisto e o papel da fragmentação do DNA espermático neste desenvolvimento. Este projeto visa comparar o perfil lipídico de embriões de camundongos originados de espermatozoides com e sem fragmentação de DNA induzida por estresse térmico. Neste estudo, serão utilizados camundongos FVB/NJ e C57BL/6, formado grupos por fertilização in vitro, fertilização in vivo com coleta de zigoto e cultivo até estágio de blastocisto e fertilização in vivo com coleta em estágio de blastocisto, e seus controles. A análise lipídica dos embriões será realizada usando a técnica de MALDI TOF/TOF (Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization - Time of Flight/ Time of Flight) Em seguida, os blastocistos serão corados com hoechst 33342 e iodeto de propídeo para analisar o número de células e qualidade embrionária. (AU)